血型与输血.ppt
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血型与输血
第一节 红细胞血型系统
ABO血型系统
一. ABO系统抗原
1.ABO系统抗原的遗传
控制基因： ABO ，Hh，Sese
Hh，Sese：在19号染色体上
ABO：在9号染色体长臂3区4带
A、B为显性基因，O为隐性基因
6种基因型：AA，AO，BB，BO，AB，OO
4种表现型：A，B，AB，O
从父母的血型，可推测子代的血型，从而有助于做亲子鉴定。
父母血型 子代可能血型子代不可能血型 A×AA，O B，AB AB×OA，B O，B
A×B A，B，AB，O -...... ...
2.ABO抗原的生物合成
RBC
N-乙酰半乳糖胺
D-半乳糖
N-乙酰葡萄糖胺
RBC----------------------
RBC-------------------
H物质
RBC---------------------
不管是A型或B型红细胞上，都还有一定数量未转变的H抗原。
* A型RBC上有：A，H抗原
* B型RBC上有：B，H抗原
* AB型RBC上有：A，B，H抗原
* O型RBC上有：H抗原
H抗原活力强度的顺序为O>A2>A2B>B>A1>A1B。
3.抗原的发生：
5-6周胎儿红细胞已可测出ABH抗原，但整个妊娠期间其浓度增长不快，即使到出生时还未发育完全，一般在生后18个月时才能充分表现出抗原性，此点在测定血型时应加以注意。
4.分泌型：
* ABH抗原不仅存在于红细胞膜上，白细胞，血小板及其它组织细胞上也可发现ABH抗原。事实上，组织细胞也能合成分泌可溶性ABH抗原，所以ABH血型特异物质能在所有与ABH基因遗传有关的分泌物中发现，而存在于许多体液中，如唾液、尿液、泪液、胃液、胆汁、羊水、血清等，但脑脊液中没有。
* 体液中的这些可溶性抗原又被称为"血型物质"，以唾液中最多。
ABH Ag：
*在RBC膜上，称血型抗原，是完全抗原，脂溶性。
*在体液中，称血型物质，是半抗原，水溶性。
* 分泌型：血型物质以唾液中有这种血型物质者为分泌型，占80%。
* 非分泌型：唾液中无血型物质者为非分泌型，占20%。
* 二者受控于Sese基因。
血型物质存在的意义有：
①测定唾液中血型物质辅助鉴定血型；
②中和ABO血型系统中的"天然抗体" ，有助于检查免疫性抗体；
③检查羊水，预测胎儿ABO血型等。
二.ABO系统抗体
* ABO血型系统抗体有"天然抗体"与免疫性抗体之分。人类在没有可觉察的抗原刺激下而产生的抗体谓之"天然抗体"。也就是说，人血清中存在的抗体能天然地与其自身红细胞所缺乏的A、B、抗原相对应(表4-1)。这种可预见的相互关系是血型定型的依据。
1.天然抗体
所谓天然抗体产生的机制也可能是由一种无觉察的免疫刺激产生而得。人红细胞膜上的ABH抗原决定簇是一类比较简单寡糖，在生物界非血型抗原所特有，有些细菌表面就有类似的糖链结构。因此这些细菌就具有与人红细胞ABH同样的抗原性，而这些细菌广泛分布于环境中如食物与尘埃上，甚至存在肠道内，它们不断给人以类A类B抗原的刺激。因此，红细胞上缺乏此种抗原的个体，经过接触，针对自己所缺乏的抗原而产生相应的抗体，故近来认为所谓天然抗体实际体上也与是通过免疫而产生的。
2.免疫性抗体
免疫性抗体:
经A或B抗原特异性刺激而产生的抗A或抗B抗体.
它有三个来源
1.母胎血型不合的妊娠
2.错误输血
3.注射疫苗
3.几种常见的ABO血型抗体
(1).抗A、抗B抗体：和一切抗体一样，血型抗体也是免疫球蛋白，天然抗体主要是IgM，免疫性抗体主要是IgG。但这种区分界限也不十分明确，事实上人的IgM和IgG血型抗体往往同时存在。抗A和抗B可以完全是IgM，也可以是IgM与IgG，甚至是IgM、G、A 混合。总体而言，抗A与抗B主要是IGM，而O型血清中是以IgG为主.
天然抗体IgM又称完全抗体或盐水抗体,免疫性抗体IgG又称不完全抗体。两种血型抗体的主要区别见94页表.
人在出生前尚未产生抗体，生后几个月才开始形成自己的抗体，5-6岁时达高峰。产生的抗体的功能一直延续到生命的晚期，但成人后其效价随年龄增长而逐渐降低。新生儿检测血型时应十分慎重，可因抗体效价低而凝集不明显，也可因母亲的IgG抗A或抗B通过胎盘进入胎儿体内而影响测定。
(2)抗A、B抗体
O型人血清中不仅有抗A、抗B抗体，还含有一种抗 A、B抗体，它与 A型或B型红细胞都能凝集，但当用 A或B型红细胞分别吸收时，不能将其分为特异的抗 A和抗B，即它与两种红细胞反应的活性不能通过特异吸收来分离。即使用A和B型红细胞反复吸收，它仍保持与A和B型红细胞都凝集的活性。所以抗 A、B具有的血清学活性不可能在抗 A和抗B的混合液中找到。这种现象的最好解释可能是O型血清中的抗 A、B是一种直接针对A和B抗原体共同的抗体结构。
O型人血清的这种抗 A、B可能是IgM和IgG，或者是IgG、M、A的混合物。抗A、B抗体比抗A和抗B抗体更易通过胎盘，也说明有IgG的存在。未经免疫的O型人血清中证明有少量抗A、B抗体。如有输血不当或因妊娠使O型人接触了A或B抗原，可以引起免疫型抗A、B抗体增加。
三.ABO血型系统亚型
亚型是指属同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数有一定差异所引起的变化。
1. A亚型
* ABO血型系统中以A亚型最多见，A抗原的两个主要亚型是A1和A2。用B型血清测定A型红细胞时，A1和A2亚型均与之凝集，如将其中抗A吸收掉，只剩下抗A1，则A1 红细胞可以与之反应，而A2红细胞则不能与之反应。
* A1型：
* 凡与抗A1血清凝集反应者为A1型，如果同时还与抗B凝集，则为A1B型，* A2型：
* 不与抗A1血清凝集者为A2或A2B型。
为了防止把A亚型误认为O型及其它，应采取的措施是：
(1)正反定型
(2)加入一管O型血清.
① O型血清中抗A比B型血清中抗A效价高得多
② O型血清中含有抗A 、B抗体，能与A型RBC发生凝集反应。
2. B亚型： Bx, ,类B
四.ABO异常血型
* 嵌合体型
* 孟买型
* CiS-AB型
五.ABO血鉴定
通常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判断血型。常规的方法包括正向定型与反向定型.
(一).原理
1.正向定型:
是用已知的抗A和抗B分型 血清测定RBC上有无相应的A抗原或B 抗原.
2.反向定型:
是用已知的A型或B型红细胞来检查血清中有无相应的抗A或抗B抗体.
凡出现 凝集者为阳性，红细胞呈散在游离状态为阴性.
(二)试剂和标本
1.抗A、抗B和抗A、B标准血清
应符合下述条件：
①高度特异性:只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集；
②抗A血清效价在1：128以上，抗B血清效价在1：64以上；
③亲和力要求抗体和抗原发生反应的速度应在两者相加后15秒内出现凝集，其强度为3分钟时凝块不小于1mm2；
④冷凝集素效价在1：4以下。
⑤无菌
2.标准RBC: 均采自健康人
(三)鉴定方法：玻片法 ，试管法
1.正定型
2.反定型
3.只有A型人血液
4.只有B型人血液
(四)质量控制
(五)正反定型结果不一致的常见原因:
1.技术上 的失误P96~97
假阴性1234
假阳性1234
2.被检者血清问题123
3.被检者红细胞问题123
(六)正反定型结果不一致的解决办法:
123456
七.A亚型鉴定
1.原理:
B型血清中含有抗A和抗A1 抗体,抗A抗体与A1 及A2 型RBC均发生凝集,而抗A1 抗体只与A1 型RBC发生凝集. A2 型RBC上只有A抗原,仅与抗A抗体发生反应.如将已知A2型RBC与B型血清混合,则血清中抗A抗体被A2型RBC上的A抗原吸收,仅留下抗A1 抗体,以此抗A1 血清即可鉴别A1和A2亚型.
2.鉴定程序:
B型血清(抗A+抗A1 抗体) + A2 型RBC
+ 待检A型RBC
凝集: A1 型RBC
不凝集: A2 型RBC
3. A亚型鉴定的注意事项
(1)A1与A2红细胞究竟为质的不同还是量的不同，各有依据，因此检查时必须掌握反应时间。
(2)如A1和A2对照红细胞都凝集，表示抗A1血清有问题，如A1和A2对照红细胞都不凝集，则再观察一段时间，如始终不显凝集，也说明抗A1血清有问题。
(3)新生儿红细胞ABO血型抗原较弱，不宜做亚型鉴定。
八.交叉配血试验
1.目的
重新鉴定血型
检测ABO以外的不规则抗体.
2.原理：盐水凝集
3.方法:试管法
主管:供血者2%红细胞悬液3滴+受血者血清3滴
次管:受血者2%红细胞悬液3滴+供血者血清3滴
4.报告方式:
供血者×××红细胞与受血者×××血清不凝
受血者×××红细胞与供血者×××血清不凝
5.质量控制P104:6条
6.交叉配血试验错误的原因:
* 责任:查对, 加样, 不遵守操作常规
* 技术:同前血型鉴定
九.ABO血型检查的临床意义
(1)输血：输血前必须检查血型，选择血型相同的供血者，进行交叉配血完全相合才能输血。
(2) 器官移植：受者与供者也必须ABO血型相符合才能移植，血型不符极易引起急性排异反应、导致移植失败。
(3)新生儿溶血：母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病，主要是依靠血型血清学检查来诊断。
(4)亲子鉴定、法医学鉴定
Rh血型系统
一.Rh血型抗原:
Rh基因位于人的第1对染色体上,抗原有40多种,与临床密切的有5种,即D,E,C,c,e,抗原性D>E>C>c>e.
Rh阳性:RBC含有D抗原.
Rh阴性:RBC不含D抗原.
二.Rh血型亚型
1.Du(弱D):是D抗原的变异体，为一组弱D抗原,属Rh阳性.
作为献血者,应输给Rh阳性者
作为受血者,应输入Rh阴性血.
形成D的常见原因有三：
①直接遗传；
②缺乏一个或几个正常D的亚单位;
D抗原至少有4个单位，即Dabcd，而Du可能缺乏其中一个或几个；
③C发生位置效应;
即C与D呈倒位时，可经抑制D的完全表现，如呈正常位时则没有这抑制现象。
2.-D-(缺失型)
本型十分少见，-D-/-D-遗传基因型红细胞只有D抗原，缺乏C、E、c\e抗原。其红细胞上D抗原位点比一般红细胞多，抗原活性强，能与抗D抗体在盐水中凝集。
3. Rhnull
此型红细胞上测不出Rh抗原，也没有LW抗原，但能产生广谱抗Rh抗体，其红细胞血清能与除Rhnull以外所有红细胞发生反应。
三.Rh系统抗体
各种Rh抗原的抗体多通过输血或妊娠等刺激后产生，所以为IgG不完全抗体.符合前述 IgG特点.
四.Rh血型鉴定及方法学评价
1.酶介质法：木瓜酶或菠萝酶可以破坏红细胞表面的唾液酸，使红细胞膜失去电荷，缩小红细胞间的距离；同时酶还可以部分地改变红细胞结构，使某些隐蔽的抗原得以暴露，这样,不完全抗体就能使经酶处理的RBC在盐水介质中发生凝集.
该方法灵敏性高，但操作烦琐,应用范围窄,且酶试剂易失活.
2.抗人球蛋白法：又称Coombs试验。是最早用于检查不完全抗体的方法，可用作Rh 血型鉴定。
(1)直接Coombs试验:是检查体内致敏RBC的一种方法,用于检查RBC是否已被不完全抗体致敏.
抗球蛋白血清+RBC悬液 看凝集否
凝集:RBC已被不完全抗体致敏.
不凝集:RBC未被不完全抗体致敏.
(2).间接Coombs试验:
是一种检测血清中不完全血型抗体的方法,常用于血型鉴定、抗体的检出和鉴定、输血前交叉配血试验以及其它特殊研究.如:
鉴定血型:
标准抗D血清+RBC悬液 看凝集否
凝集:有D,Rh(+);
不凝集:Rh(-).
检查抗D:
Rh (+)RBC+待测血清+抗人IgG
凝集否
凝集: 抗D(+);
不凝集:抗D (-).
Coombs试验是检查不完全抗体最可靠的方法,可检测出因免疫性血型抗体引起的血型不合,该法还可克服因血浆蛋白紊乱或Fg增加对正常配血的干扰.但试剂供应少,价格较贵,操作烦琐,多用于特殊需要时.......（后略) ......
血型与输血
第一节 红细胞血型系统
ABO血型系统
一. ABO系统抗原
1.ABO系统抗原的遗传
控制基因： ABO ，Hh，Sese
Hh，Sese：在19号染色体上
ABO：在9号染色体长臂3区4带
A、B为显性基因，O为隐性基因
6种基因型：AA，AO，BB，BO，AB，OO
4种表现型：A，B，AB，O
从父母的血型，可推测子代的血型，从而有助于做亲子鉴定。
父母血型 子代可能血型子代不可能血型 A×AA，O B，AB AB×OA，B O，B
A×B A，B，AB，O -...... ...
2.ABO抗原的生物合成
RBC
N-乙酰半乳糖胺
D-半乳糖
N-乙酰葡萄糖胺
RBC----------------------
RBC-------------------
H物质
RBC---------------------
不管是A型或B型红细胞上，都还有一定数量未转变的H抗原。
* A型RBC上有：A，H抗原
* B型RBC上有：B，H抗原
* AB型RBC上有：A，B，H抗原
* O型RBC上有：H抗原
H抗原活力强度的顺序为O>A2>A2B>B>A1>A1B。
3.抗原的发生：
5-6周胎儿红细胞已可测出ABH抗原，但整个妊娠期间其浓度增长不快，即使到出生时还未发育完全，一般在生后18个月时才能充分表现出抗原性，此点在测定血型时应加以注意。
4.分泌型：
* ABH抗原不仅存在于红细胞膜上，白细胞，血小板及其它组织细胞上也可发现ABH抗原。事实上，组织细胞也能合成分泌可溶性ABH抗原，所以ABH血型特异物质能在所有与ABH基因遗传有关的分泌物中发现，而存在于许多体液中，如唾液、尿液、泪液、胃液、胆汁、羊水、血清等，但脑脊液中没有。
* 体液中的这些可溶性抗原又被称为"血型物质"，以唾液中最多。
ABH Ag：
*在RBC膜上，称血型抗原，是完全抗原，脂溶性。
*在体液中，称血型物质，是半抗原，水溶性。
* 分泌型：血型物质以唾液中有这种血型物质者为分泌型，占80%。
* 非分泌型：唾液中无血型物质者为非分泌型，占20%。
* 二者受控于Sese基因。
血型物质存在的意义有：
①测定唾液中血型物质辅助鉴定血型；
②中和ABO血型系统中的"天然抗体" ，有助于检查免疫性抗体；
③检查羊水，预测胎儿ABO血型等。
二.ABO系统抗体
* ABO血型系统抗体有"天然抗体"与免疫性抗体之分。人类在没有可觉察的抗原刺激下而产生的抗体谓之"天然抗体"。也就是说，人血清中存在的抗体能天然地与其自身红细胞所缺乏的A、B、抗原相对应(表4-1)。这种可预见的相互关系是血型定型的依据。
1.天然抗体
所谓天然抗体产生的机制也可能是由一种无觉察的免疫刺激产生而得。人红细胞膜上的ABH抗原决定簇是一类比较简单寡糖，在生物界非血型抗原所特有，有些细菌表面就有类似的糖链结构。因此这些细菌就具有与人红细胞ABH同样的抗原性，而这些细菌广泛分布于环境中如食物与尘埃上，甚至存在肠道内，它们不断给人以类A类B抗原的刺激。因此，红细胞上缺乏此种抗原的个体，经过接触，针对自己所缺乏的抗原而产生相应的抗体，故近来认为所谓天然抗体实际体上也与是通过免疫而产生的。
2.免疫性抗体
免疫性抗体:
经A或B抗原特异性刺激而产生的抗A或抗B抗体.
它有三个来源
1.母胎血型不合的妊娠
2.错误输血
3.注射疫苗
3.几种常见的ABO血型抗体
(1).抗A、抗B抗体：和一切抗体一样，血型抗体也是免疫球蛋白，天然抗体主要是IgM，免疫性抗体主要是IgG。但这种区分界限也不十分明确，事实上人的IgM和IgG血型抗体往往同时存在。抗A和抗B可以完全是IgM，也可以是IgM与IgG，甚至是IgM、G、A 混合。总体而言，抗A与抗B主要是IGM，而O型血清中是以IgG为主.
天然抗体IgM又称完全抗体或盐水抗体,免疫性抗体IgG又称不完全抗体。两种血型抗体的主要区别见94页表.
人在出生前尚未产生抗体，生后几个月才开始形成自己的抗体，5-6岁时达高峰。产生的抗体的功能一直延续到生命的晚期，但成人后其效价随年龄增长而逐渐降低。新生儿检测血型时应十分慎重，可因抗体效价低而凝集不明显，也可因母亲的IgG抗A或抗B通过胎盘进入胎儿体内而影响测定。
(2)抗A、B抗体
O型人血清中不仅有抗A、抗B抗体，还含有一种抗 A、B抗体，它与 A型或B型红细胞都能凝集，但当用 A或B型红细胞分别吸收时，不能将其分为特异的抗 A和抗B，即它与两种红细胞反应的活性不能通过特异吸收来分离。即使用A和B型红细胞反复吸收，它仍保持与A和B型红细胞都凝集的活性。所以抗 A、B具有的血清学活性不可能在抗 A和抗B的混合液中找到。这种现象的最好解释可能是O型血清中的抗 A、B是一种直接针对A和B抗原体共同的抗体结构。
O型人血清的这种抗 A、B可能是IgM和IgG，或者是IgG、M、A的混合物。抗A、B抗体比抗A和抗B抗体更易通过胎盘，也说明有IgG的存在。未经免疫的O型人血清中证明有少量抗A、B抗体。如有输血不当或因妊娠使O型人接触了A或B抗原，可以引起免疫型抗A、B抗体增加。
三.ABO血型系统亚型
亚型是指属同一血型抗原，但抗原结构和性能或抗原位点数有一定差异所引起的变化。
1. A亚型
* ABO血型系统中以A亚型最多见，A抗原的两个主要亚型是A1和A2。用B型血清测定A型红细胞时，A1和A2亚型均与之凝集，如将其中抗A吸收掉，只剩下抗A1，则A1 红细胞可以与之反应，而A2红细胞则不能与之反应。
* A1型：
* 凡与抗A1血清凝集反应者为A1型，如果同时还与抗B凝集，则为A1B型，* A2型：
* 不与抗A1血清凝集者为A2或A2B型。
为了防止把A亚型误认为O型及其它，应采取的措施是：
(1)正反定型
(2)加入一管O型血清.
① O型血清中抗A比B型血清中抗A效价高得多
② O型血清中含有抗A 、B抗体，能与A型RBC发生凝集反应。
2. B亚型： Bx, ,类B
四.ABO异常血型
* 嵌合体型
* 孟买型
* CiS-AB型
五.ABO血鉴定
通常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判断血型。常规的方法包括正向定型与反向定型.
(一).原理
1.正向定型:
是用已知的抗A和抗B分型 血清测定RBC上有无相应的A抗原或B 抗原.
2.反向定型:
是用已知的A型或B型红细胞来检查血清中有无相应的抗A或抗B抗体.
凡出现 凝集者为阳性，红细胞呈散在游离状态为阴性.
(二)试剂和标本
1.抗A、抗B和抗A、B标准血清
应符合下述条件：
①高度特异性:只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集；
②抗A血清效价在1：128以上，抗B血清效价在1：64以上；
③亲和力要求抗体和抗原发生反应的速度应在两者相加后15秒内出现凝集，其强度为3分钟时凝块不小于1mm2；
④冷凝集素效价在1：4以下。
⑤无菌
2.标准RBC: 均采自健康人
(三)鉴定方法：玻片法 ，试管法
1.正定型
2.反定型
3.只有A型人血液
4.只有B型人血液
(四)质量控制
(五)正反定型结果不一致的常见原因:
1.技术上 的失误P96~97
假阴性1234
假阳性1234
2.被检者血清问题123
3.被检者红细胞问题123
(六)正反定型结果不一致的解决办法:
123456
七.A亚型鉴定
1.原理:
B型血清中含有抗A和抗A1 抗体,抗A抗体与A1 及A2 型RBC均发生凝集,而抗A1 抗体只与A1 型RBC发生凝集. A2 型RBC上只有A抗原,仅与抗A抗体发生反应.如将已知A2型RBC与B型血清混合,则血清中抗A抗体被A2型RBC上的A抗原吸收,仅留下抗A1 抗体,以此抗A1 血清即可鉴别A1和A2亚型.
2.鉴定程序:
B型血清(抗A+抗A1 抗体) + A2 型RBC
+ 待检A型RBC
凝集: A1 型RBC
不凝集: A2 型RBC
3. A亚型鉴定的注意事项
(1)A1与A2红细胞究竟为质的不同还是量的不同，各有依据，因此检查时必须掌握反应时间。
(2)如A1和A2对照红细胞都凝集，表示抗A1血清有问题，如A1和A2对照红细胞都不凝集，则再观察一段时间，如始终不显凝集，也说明抗A1血清有问题。
(3)新生儿红细胞ABO血型抗原较弱，不宜做亚型鉴定。
八.交叉配血试验
1.目的
重新鉴定血型
检测ABO以外的不规则抗体.
2.原理：盐水凝集
3.方法:试管法
主管:供血者2%红细胞悬液3滴+受血者血清3滴
次管:受血者2%红细胞悬液3滴+供血者血清3滴
4.报告方式:
供血者×××红细胞与受血者×××血清不凝
受血者×××红细胞与供血者×××血清不凝
5.质量控制P104:6条
6.交叉配血试验错误的原因:
* 责任:查对, 加样, 不遵守操作常规
* 技术:同前血型鉴定
九.ABO血型检查的临床意义
(1)输血：输血前必须检查血型，选择血型相同的供血者，进行交叉配血完全相合才能输血。
(2) 器官移植：受者与供者也必须ABO血型相符合才能移植，血型不符极易引起急性排异反应、导致移植失败。
(3)新生儿溶血：母婴ABO血型不合引起的新生儿溶血病，主要是依靠血型血清学检查来诊断。
(4)亲子鉴定、法医学鉴定
Rh血型系统
一.Rh血型抗原:
Rh基因位于人的第1对染色体上,抗原有40多种,与临床密切的有5种,即D,E,C,c,e,抗原性D>E>C>c>e.
Rh阳性:RBC含有D抗原.
Rh阴性:RBC不含D抗原.
二.Rh血型亚型
1.Du(弱D):是D抗原的变异体，为一组弱D抗原,属Rh阳性.
作为献血者,应输给Rh阳性者
作为受血者,应输入Rh阴性血.
形成D的常见原因有三：
①直接遗传；
②缺乏一个或几个正常D的亚单位;
D抗原至少有4个单位，即Dabcd，而Du可能缺乏其中一个或几个；
③C发生位置效应;
即C与D呈倒位时，可经抑制D的完全表现，如呈正常位时则没有这抑制现象。
2.-D-(缺失型)
本型十分少见，-D-/-D-遗传基因型红细胞只有D抗原，缺乏C、E、c\e抗原。其红细胞上D抗原位点比一般红细胞多，抗原活性强，能与抗D抗体在盐水中凝集。
3. Rhnull
此型红细胞上测不出Rh抗原，也没有LW抗原，但能产生广谱抗Rh抗体，其红细胞血清能与除Rhnull以外所有红细胞发生反应。
三.Rh系统抗体
各种Rh抗原的抗体多通过输血或妊娠等刺激后产生，所以为IgG不完全抗体.符合前述 IgG特点.
四.Rh血型鉴定及方法学评价
1.酶介质法：木瓜酶或菠萝酶可以破坏红细胞表面的唾液酸，使红细胞膜失去电荷，缩小红细胞间的距离；同时酶还可以部分地改变红细胞结构，使某些隐蔽的抗原得以暴露，这样,不完全抗体就能使经酶处理的RBC在盐水介质中发生凝集.
该方法灵敏性高，但操作烦琐,应用范围窄,且酶试剂易失活.
2.抗人球蛋白法：又称Coombs试验。是最早用于检查不完全抗体的方法，可用作Rh 血型鉴定。
(1)直接Coombs试验:是检查体内致敏RBC的一种方法,用于检查RBC是否已被不完全抗体致敏.
抗球蛋白血清+RBC悬液 看凝集否
凝集:RBC已被不完全抗体致敏.
不凝集:RBC未被不完全抗体致敏.
(2).间接Coombs试验:
是一种检测血清中不完全血型抗体的方法,常用于血型鉴定、抗体的检出和鉴定、输血前交叉配血试验以及其它特殊研究.如:
鉴定血型:
标准抗D血清+RBC悬液 看凝集否
凝集:有D,Rh(+);
不凝集:Rh(-).
检查抗D:
Rh (+)RBC+待测血清+抗人IgG
凝集否
凝集: 抗D(+);
不凝集:抗D (-).
Coombs试验是检查不完全抗体最可靠的方法,可检测出因免疫性血型抗体引起的血型不合,该法还可克服因血浆蛋白紊乱或Fg增加对正常配血的干扰.但试剂供应少,价格较贵,操作烦琐,多用于特殊需要时.......（后略) ......
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