细菌性食源性疾病及其病原学检验规程 .ppt
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参见附件(2591kb)。
上海市疾病预防控制中心
陈悦
细菌性食源性疾病及其病原学检验规程
细菌性食源性疾病
? 由细菌通过摄食而进入人体的，使人体患感染性或中毒性的一类疾病。属食源性疾病范畴，主要包括细菌性肠道传染病和细菌性食物中毒
细菌性肠道传染病
? 属我国法定传染病，主要包括霍乱、痢疾、伤寒、副伤寒及新近参照传染病管理的由肠出血性大肠埃希菌O157引起的出血性肠炎
细菌性食物中毒
? 人体摄入了被细菌或其毒素污染的食品后所出现的非传染性急性、亚急性疾病
细菌性食源性疾病处置程序
? 细菌性食物中毒应急处理程序(附图1 )
? 首接单位可能是区县疾控中心或区县卫监所
? 卫生监督所负责调查处理，疾控检验机构配合检验
? 细菌性肠道传染病应急处置程序(附图1 )
? 联合应急处理小组中疾控中心负责流调和病人采样，卫生监督所负责卫生调查和食品环节采样
现场调查
? 根据患者的临床症状，核实诊断，初步判断是否属食物中毒或食源性疾病
? 现场流行病学个案调查
? 卫生学调查
? 确定常见细菌性食源性疾病和食物中毒的样品采集种类与范围和相关检验项目
细菌性食源性疾病的主要临床特征
(附表1)
? 细菌性食源性疾病有关症状与病原学检验项目、检验样品关系
? (附表2)
样品采集流程
? 样品采集与送检流程
? 无菌采样方法采集
? 及时做好样品标记，完整填写采样送检申请单(见附表4)
? 详细填明检样名称、来源、送检时间、中毒情况、患者主要临床症状、检验项目等
样品采集数量
? 学校等集体单位至少采集新发病人或具有典型的临床症状、未经过抗生素治疗的样品(粪便或肛拭)10份
? 可疑食品应采集5份(留样食品、原配料、半成品)
? 食品容器、用具和加工设备等环节采样5-10份
? 食堂或盒饭公司从事食品从业人员进行肛拭采样
样品采集注意事项
? 采样用的试管、瓶子、盛器、剪刀、镊子、棉拭等均应无菌
? 采样用的生理盐水、卡里运送培养基及有关试剂等都应该满足新鲜、无菌的要求，同时应符合采样所需要的试剂量，卡里运送培养基为5ml/管为宜
? 肛拭、食品和环节等采样，其采样量须满足必须开展的检验项目的要求，如肛拭采样至少要用2根棉拭，食品采样应尽量多于25g(ml)以上
? 采样的同时，应及时做好样品标记，完整填写采样单。立即将检样送检验室，并有交接手续
各类样品采集方法(1)
? 可疑食物、水样：将残余食物或水样用灭菌镊子或匙采取后置于灭菌容器中。体积较大的鱼、肉应在表面消毒后取内部检样。罐头样品可直接送检
? 环节样品：炊事用具如锅、碗、刀、抹布、操作人员的手等用棉拭涂擦采样，菜墩用刀刮取表面后将刮取物放入灭菌容器中
各类样品采集方法(2)
? 粪便、肛拭：粪便标本应尽量在病程早期和治疗前采集，同时应采集新鲜粪便，选取有脓血、粘液部分3-5克、水样便取含絮状物的2-5ml，盛于无菌容器中及时送检。若无法获得粪便时，可用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4-5cm深处(小儿2-3cm)，轻轻转动一圈，擦取直肠表面的黏液后取出，盛入运送培养基或保存液中送检。注意为保证多个检验项目的开展，同一病人应至少采集2支肛拭
各类样品采集方法(3)
? 呕吐物：直接放入无菌容器中及时送检
? 咽拭样品：采集时应将棉签檫拭咽喉及扁桃体红肿处(特别是白膜处)，然后将棉签插入4-5ml生理盐水中，尾部弃去
? 血液：采集患者急性发病期(3天内)和恢复期(2周左右)各3ml全血分离血清送检
各类样品采集方法(4)
? 从业人员：据食物中毒的情况要求，可采取售货员或制作食品的工作人员及直接或间接接触食品的有关人员肛拭检样，特别对那些在事件发生前或现正患有肠炎、发烧、化脓性及可疑带菌者进行采样
样品送检
? 检样采取后立即由专人在2小时内送区县疾病预防控制中心或(和)市疾病预防控制中心实验室检验
? 送检检样时，应附送采样送检申请单，并按要求注意冷藏
? 样品送检人员应与实验室收样或检验人员履行样品交接手续
样品检验的能级分工
? 一般食源性细菌性突发事件由事件发生所在地区县疾控系统检验机构承担
? 重大食源性细菌性突发事件以事件发生所在地区县疾控系统检验机构承担为主，市疾控检验机构应共同参与检验工作
? 特大食源性细菌性突发事件由市疾控检验机构和事件发生所在地区县疾控系统检验机构组成的现场检验小组共同承担
检验项目的分级
? 区县疾控系统检验机构应承担霍乱弧菌、副溶血弧菌及其它致病性弧菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、沙门菌、变形杆菌、致泻性大肠埃希菌、空肠弯曲菌、小肠结肠耶尔森菌、志贺菌、溶血性链球菌及单核细胞增生李斯特菌引起的食源性突发事件的样品检验
检验项目的分级
? 市疾控检验机构除开展以上全部检验项目外，还需承担金黄色葡萄球菌肠毒素、各类致泻性大肠埃希菌毒素(或毒素基因)的测定以及区县疾控系统检验机构检出的霍乱弧菌、大肠埃希菌O157和疑难菌株的最终鉴定工作
? 在一般食源性细菌性突发事件和重大食源性细菌性突发事件的样品检验工作中市疾控检验机构应承担技术指导和质量控制的职责
检验技术依据
? GB 4789-2003《食品卫生微生物检验》
? GB 17012-1997《感染性腹泻的诊断标准和处理原则》
? WS/T8-1996《病原性大肠艾希氏菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T9-1996《变形杆菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T13-1996《沙门氏菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T80-1996《葡萄球菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T81-1996《副溶血性弧菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T82-1996《蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断标准及处理原则》
细菌性食源性疾病的检验宗旨
? 竭尽全力尽快找到病原体
? 快速、准确
? 可与传统方法不一定完全相同
? 细菌性食源性疾病样品检验的一般程序
? (附图2)
检验程序
1 . 样品采集
↓
2. 初步检验→活菌数、直接镜检(涂片→染色→镜检)
↓
3. 分离培养 (包括增菌培养和直接平板培养) ......
上海市疾病预防控制中心
陈悦
细菌性食源性疾病及其病原学检验规程
细菌性食源性疾病
? 由细菌通过摄食而进入人体的，使人体患感染性或中毒性的一类疾病。属食源性疾病范畴，主要包括细菌性肠道传染病和细菌性食物中毒
细菌性肠道传染病
? 属我国法定传染病，主要包括霍乱、痢疾、伤寒、副伤寒及新近参照传染病管理的由肠出血性大肠埃希菌O157引起的出血性肠炎
细菌性食物中毒
? 人体摄入了被细菌或其毒素污染的食品后所出现的非传染性急性、亚急性疾病
细菌性食源性疾病处置程序
? 细菌性食物中毒应急处理程序(附图1 )
? 首接单位可能是区县疾控中心或区县卫监所
? 卫生监督所负责调查处理，疾控检验机构配合检验
? 细菌性肠道传染病应急处置程序(附图1 )
? 联合应急处理小组中疾控中心负责流调和病人采样，卫生监督所负责卫生调查和食品环节采样
现场调查
? 根据患者的临床症状，核实诊断，初步判断是否属食物中毒或食源性疾病
? 现场流行病学个案调查
? 卫生学调查
? 确定常见细菌性食源性疾病和食物中毒的样品采集种类与范围和相关检验项目
细菌性食源性疾病的主要临床特征
(附表1)
? 细菌性食源性疾病有关症状与病原学检验项目、检验样品关系
? (附表2)
样品采集流程
? 样品采集与送检流程
? 无菌采样方法采集
? 及时做好样品标记，完整填写采样送检申请单(见附表4)
? 详细填明检样名称、来源、送检时间、中毒情况、患者主要临床症状、检验项目等
样品采集数量
? 学校等集体单位至少采集新发病人或具有典型的临床症状、未经过抗生素治疗的样品(粪便或肛拭)10份
? 可疑食品应采集5份(留样食品、原配料、半成品)
? 食品容器、用具和加工设备等环节采样5-10份
? 食堂或盒饭公司从事食品从业人员进行肛拭采样
样品采集注意事项
? 采样用的试管、瓶子、盛器、剪刀、镊子、棉拭等均应无菌
? 采样用的生理盐水、卡里运送培养基及有关试剂等都应该满足新鲜、无菌的要求，同时应符合采样所需要的试剂量，卡里运送培养基为5ml/管为宜
? 肛拭、食品和环节等采样，其采样量须满足必须开展的检验项目的要求，如肛拭采样至少要用2根棉拭，食品采样应尽量多于25g(ml)以上
? 采样的同时，应及时做好样品标记，完整填写采样单。立即将检样送检验室，并有交接手续
各类样品采集方法(1)
? 可疑食物、水样：将残余食物或水样用灭菌镊子或匙采取后置于灭菌容器中。体积较大的鱼、肉应在表面消毒后取内部检样。罐头样品可直接送检
? 环节样品：炊事用具如锅、碗、刀、抹布、操作人员的手等用棉拭涂擦采样，菜墩用刀刮取表面后将刮取物放入灭菌容器中
各类样品采集方法(2)
? 粪便、肛拭：粪便标本应尽量在病程早期和治疗前采集，同时应采集新鲜粪便，选取有脓血、粘液部分3-5克、水样便取含絮状物的2-5ml，盛于无菌容器中及时送检。若无法获得粪便时，可用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4-5cm深处(小儿2-3cm)，轻轻转动一圈，擦取直肠表面的黏液后取出，盛入运送培养基或保存液中送检。注意为保证多个检验项目的开展，同一病人应至少采集2支肛拭
各类样品采集方法(3)
? 呕吐物：直接放入无菌容器中及时送检
? 咽拭样品：采集时应将棉签檫拭咽喉及扁桃体红肿处(特别是白膜处)，然后将棉签插入4-5ml生理盐水中，尾部弃去
? 血液：采集患者急性发病期(3天内)和恢复期(2周左右)各3ml全血分离血清送检
各类样品采集方法(4)
? 从业人员：据食物中毒的情况要求，可采取售货员或制作食品的工作人员及直接或间接接触食品的有关人员肛拭检样，特别对那些在事件发生前或现正患有肠炎、发烧、化脓性及可疑带菌者进行采样
样品送检
? 检样采取后立即由专人在2小时内送区县疾病预防控制中心或(和)市疾病预防控制中心实验室检验
? 送检检样时，应附送采样送检申请单，并按要求注意冷藏
? 样品送检人员应与实验室收样或检验人员履行样品交接手续
样品检验的能级分工
? 一般食源性细菌性突发事件由事件发生所在地区县疾控系统检验机构承担
? 重大食源性细菌性突发事件以事件发生所在地区县疾控系统检验机构承担为主，市疾控检验机构应共同参与检验工作
? 特大食源性细菌性突发事件由市疾控检验机构和事件发生所在地区县疾控系统检验机构组成的现场检验小组共同承担
检验项目的分级
? 区县疾控系统检验机构应承担霍乱弧菌、副溶血弧菌及其它致病性弧菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、沙门菌、变形杆菌、致泻性大肠埃希菌、空肠弯曲菌、小肠结肠耶尔森菌、志贺菌、溶血性链球菌及单核细胞增生李斯特菌引起的食源性突发事件的样品检验
检验项目的分级
? 市疾控检验机构除开展以上全部检验项目外，还需承担金黄色葡萄球菌肠毒素、各类致泻性大肠埃希菌毒素(或毒素基因)的测定以及区县疾控系统检验机构检出的霍乱弧菌、大肠埃希菌O157和疑难菌株的最终鉴定工作
? 在一般食源性细菌性突发事件和重大食源性细菌性突发事件的样品检验工作中市疾控检验机构应承担技术指导和质量控制的职责
检验技术依据
? GB 4789-2003《食品卫生微生物检验》
? GB 17012-1997《感染性腹泻的诊断标准和处理原则》
? WS/T8-1996《病原性大肠艾希氏菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T9-1996《变形杆菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T13-1996《沙门氏菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T80-1996《葡萄球菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T81-1996《副溶血性弧菌食物中毒诊断标准及处理原则》、WS/T82-1996《蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断标准及处理原则》
细菌性食源性疾病的检验宗旨
? 竭尽全力尽快找到病原体
? 快速、准确
? 可与传统方法不一定完全相同
? 细菌性食源性疾病样品检验的一般程序
? (附图2)
检验程序
1 . 样品采集
↓
2. 初步检验→活菌数、直接镜检(涂片→染色→镜检)
↓
3. 分离培养 (包括增菌培养和直接平板培养) ......
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