(第八册)微生物与血库作业指导书 .doc
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参见附件(390kb)。
微生物与血库
作业指导书
文件编号:ABCD-3-WS-01~10
ABCD-3-WS-01~05
第A版
编制:
审核:
批准:
生效日期:2006年8月8日
ABCD人民医院检验科
目 录
序号主 题 内 容 代 号页 号微生物室作业指导书部分 1结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定ABCD-3-WS-0142涂片找抗酸杆菌操作规程
ABCD-3-WS-0263普通细菌培养鉴定操作规程
ABCD-3-WS-0384尿液培养操作规程
ABCD-3-WS-04105血液培养操作规程
ABCD-3-WS-05126黑马Bact-ist微生物分析系统操作维护规程
ABCD-3-WS-06147GNP-9270型隔水式恒温培养箱操作维护规程
ABCD-3-WS-07188BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程
ABCD-3-WS-08199BSC-1100ⅡB2型生物安全柜操作维护规程
ABCD-3-WS-092410飞鸽牌离心机操作维护规程
ABCD-3-WS-1028血库作业指导书部分1血库工作制度
ABCD-3-XK-01302交叉配血(凝聚胺法)
ABCD-3-XK-02313ABO血型鉴定(生理盐水法)
ABCD-3-MY-03334ABO正定型和Rh血型鉴定
ABCD-3-MY-04385KJX-IA型冰冻血浆解冻箱
ABCD-3-MY-0541
修 订 页
序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021
结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定
1 检验目的
做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理
若接种的MGIT培养管中有分支杆菌生长,管中的营养成分和氧气将不断被消耗,MGIT培养管中的荧光显示剂将随着管内氧气浓度的变化而发生反应。一旦培养管内氧气被利用,管内荧光指示剂将在特定光源的激活下释放荧光。BACTEC MGIT960荧光强度记忆探测器将每隔60min连续测定培养管内荧光强度,从而判断管内分支杆菌生长情况。
3 标本要求
(1)标本类型:深部痰液。
(2)标本采集:见标本采集手册
(3)标本储存和运输:室温放置,室温运输并立即送检。
(4)标本拒收状态:非无菌方式采集的标本。
4 容器和添加剂类型
使用灭菌器皿盛放标本,不加任何防腐剂。
5 试剂
(1)试剂名称:Middlebrook7H9培养肉汤,OADC营养添加剂,抑菌剂PANTA。
(2)试剂生产厂家:美国BD生物技术有限公司
(3)包装规格:7X100
(4)试剂盒组成:培养肉汤,营养添加剂,抑菌剂
6仪器设备:
BACTEC MGIT960全自动分支杆菌培养仪;美国BD生物技术有限公司。
酒精灯
显微镜、超净工作台、台式离心机
7校准程序
(送XX市计量质量检测研究所校准)
8操作步骤
见仪器操作维护规程:BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程;
9质量控制:
参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动
10 生物参考区间
阴性
11 患者检验结果的可报告区间
阴性/阳性,药敏及菌种鉴定见BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程;
12 临床意义:
分支杆菌的药敏试验有助于筛选有效的抗结核药物,提示药物所需的治疗剂量,供临床医生和防痨医生参考;同时,还可了解耐药株的流行情况,为抗结核药物的合理应用提供试验依据。
涂片找抗酸杆菌操作规程
(改良碱性复红法)
1 检验目的
检验样本中是否含有抗酸杆菌,为临床提供诊断依据。
2 原理
结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)。
3标本要求
(1)标本类型:病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等
(2)标本采集:见标本采集手册(一般须得深咳痰,其它无特殊要求。)
(3)标本储存和运输:可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。
4 容器和添加剂类型
痰盒、尿杯、试管等
6 试剂
(1) 试剂名称:结核菌染色液
(2)试剂生产厂家:广东省结核病研究所统一配制
(3)包装规格:3X500ML
(4)试剂盒组成:
试剂1:石碳酸复红液
试剂2:酸性酒精溶液
试剂3:亚甲基蓝溶液
7仪器设备:
CHKIKO320 奥林巴斯双目显微镜 BH-2奥林巴斯落射荧光显微镜
8 校准程序
送XX市计量质量检测研究所校准
9操作步骤
⑴涂片经火焰固定,加石碳酸复红液染色5分钟或更久(需加温)。
⑵水洗(之后尽可能将水沥干)。
⑶加酸性酒精溶液,脱色1-2分钟。
⑷水洗(假如标本面还可以看到残存红色时,再加酸性酒精溶液脱掉红色为止)。
⑸加亚甲基蓝溶液染色30秒,水洗,干燥。
(6)镜检。
10 质量控制:
参加我科质量管理组的质量控制活动。
11 干扰和交叉反应
麻风菌可能对检验结果产生影响。
12 生物参考区间
涂片未见抗酸杆菌
13 患者检验结果的可报告区间
涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌
14 临床意义:
结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素,其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力,细菌成分与其代谢产物引起免疫反应(Ⅳ型)导致一系列组织学上的意义。
普通细菌培养鉴定操作规程
1 检验目的
做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理
人体很多部位与外界相通,存在栖息菌群,但不致病,当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义;另外机体某些部位是无菌的 ,如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操作污染。
3 标本要求 ......
微生物与血库
作业指导书
文件编号:ABCD-3-WS-01~10
ABCD-3-WS-01~05
第A版
编制:
审核:
批准:
生效日期:2006年8月8日
ABCD人民医院检验科
目 录
序号主 题 内 容 代 号页 号微生物室作业指导书部分 1结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定ABCD-3-WS-0142涂片找抗酸杆菌操作规程
ABCD-3-WS-0263普通细菌培养鉴定操作规程
ABCD-3-WS-0384尿液培养操作规程
ABCD-3-WS-04105血液培养操作规程
ABCD-3-WS-05126黑马Bact-ist微生物分析系统操作维护规程
ABCD-3-WS-06147GNP-9270型隔水式恒温培养箱操作维护规程
ABCD-3-WS-07188BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程
ABCD-3-WS-08199BSC-1100ⅡB2型生物安全柜操作维护规程
ABCD-3-WS-092410飞鸽牌离心机操作维护规程
ABCD-3-WS-1028血库作业指导书部分1血库工作制度
ABCD-3-XK-01302交叉配血(凝聚胺法)
ABCD-3-XK-02313ABO血型鉴定(生理盐水法)
ABCD-3-MY-03334ABO正定型和Rh血型鉴定
ABCD-3-MY-04385KJX-IA型冰冻血浆解冻箱
ABCD-3-MY-0541
修 订 页
序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021
结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定
1 检验目的
做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理
若接种的MGIT培养管中有分支杆菌生长,管中的营养成分和氧气将不断被消耗,MGIT培养管中的荧光显示剂将随着管内氧气浓度的变化而发生反应。一旦培养管内氧气被利用,管内荧光指示剂将在特定光源的激活下释放荧光。BACTEC MGIT960荧光强度记忆探测器将每隔60min连续测定培养管内荧光强度,从而判断管内分支杆菌生长情况。
3 标本要求
(1)标本类型:深部痰液。
(2)标本采集:见标本采集手册
(3)标本储存和运输:室温放置,室温运输并立即送检。
(4)标本拒收状态:非无菌方式采集的标本。
4 容器和添加剂类型
使用灭菌器皿盛放标本,不加任何防腐剂。
5 试剂
(1)试剂名称:Middlebrook7H9培养肉汤,OADC营养添加剂,抑菌剂PANTA。
(2)试剂生产厂家:美国BD生物技术有限公司
(3)包装规格:7X100
(4)试剂盒组成:培养肉汤,营养添加剂,抑菌剂
6仪器设备:
BACTEC MGIT960全自动分支杆菌培养仪;美国BD生物技术有限公司。
酒精灯
显微镜、超净工作台、台式离心机
7校准程序
(送XX市计量质量检测研究所校准)
8操作步骤
见仪器操作维护规程:BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程;
9质量控制:
参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动
10 生物参考区间
阴性
11 患者检验结果的可报告区间
阴性/阳性,药敏及菌种鉴定见BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程;
12 临床意义:
分支杆菌的药敏试验有助于筛选有效的抗结核药物,提示药物所需的治疗剂量,供临床医生和防痨医生参考;同时,还可了解耐药株的流行情况,为抗结核药物的合理应用提供试验依据。
涂片找抗酸杆菌操作规程
(改良碱性复红法)
1 检验目的
检验样本中是否含有抗酸杆菌,为临床提供诊断依据。
2 原理
结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)。
3标本要求
(1)标本类型:病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等
(2)标本采集:见标本采集手册(一般须得深咳痰,其它无特殊要求。)
(3)标本储存和运输:可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。
4 容器和添加剂类型
痰盒、尿杯、试管等
6 试剂
(1) 试剂名称:结核菌染色液
(2)试剂生产厂家:广东省结核病研究所统一配制
(3)包装规格:3X500ML
(4)试剂盒组成:
试剂1:石碳酸复红液
试剂2:酸性酒精溶液
试剂3:亚甲基蓝溶液
7仪器设备:
CHKIKO320 奥林巴斯双目显微镜 BH-2奥林巴斯落射荧光显微镜
8 校准程序
送XX市计量质量检测研究所校准
9操作步骤
⑴涂片经火焰固定,加石碳酸复红液染色5分钟或更久(需加温)。
⑵水洗(之后尽可能将水沥干)。
⑶加酸性酒精溶液,脱色1-2分钟。
⑷水洗(假如标本面还可以看到残存红色时,再加酸性酒精溶液脱掉红色为止)。
⑸加亚甲基蓝溶液染色30秒,水洗,干燥。
(6)镜检。
10 质量控制:
参加我科质量管理组的质量控制活动。
11 干扰和交叉反应
麻风菌可能对检验结果产生影响。
12 生物参考区间
涂片未见抗酸杆菌
13 患者检验结果的可报告区间
涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌
14 临床意义:
结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素,其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力,细菌成分与其代谢产物引起免疫反应(Ⅳ型)导致一系列组织学上的意义。
普通细菌培养鉴定操作规程
1 检验目的
做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理
人体很多部位与外界相通,存在栖息菌群,但不致病,当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义;另外机体某些部位是无菌的 ,如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操作污染。
3 标本要求 ......
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