饮用水与寄生虫.ppt
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参见附件(10430KB)。
饮用水与寄生虫
内容
* 生物的生活方式和定义
* 蓝氏贾第鞭毛虫
* 隐孢子虫
* 有关饮用水原虫含量的标准
生物的生活方式和定义
* 自由生活
* 所谓自由生活是指各种生物体在自然界中能独立的生活，不一定需要其他生物的帮助，也不对其他生物产生危害
* 种类多
* 如牛与马
生物的生活方式和定义
* 共生生活
* 是指某些生物的生存需要其他生物的帮助，但不对给予帮助的生物产出危害
* 互利共生-互相依赖，两方均受益
* 如牛胃内的纤毛虫，以牛胃内的植物纤维为食，分解后有力牛的消化，其尸体是牛的蛋白质来源
* 片利共生-互相依赖，一方受益，另一方既不受益也不受害
* 如口腔中的齿龈内阿米巴，以口腔细菌、食物细粒和死亡的上皮细胞为食，但不入侵机体的组织
生物的生活方式和定义
* 寄生生活
* 是指某些生物一定或在生存过程中，需要其他生物的帮助，同时还对给予帮助的生物产生危害
* 能引起生物危害的生物体大多营寄生生活
* 专性寄生-一定要寄生，不然不能存活
* 如贾第贬毛虫、隐孢子虫
* 兼性寄生-既可自由生活，也可寄生生活
* 如棘阿米巴
蓝氏贾第鞭毛虫
* 蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia )简称贾第虫。
* 寄生人体小肠、胆囊，主要在十二指肠，可引起腹痛、腹泻和吸收不良等症状，致贾第虫病(giardiasis)
* 本病世界性分布，由于在旅游者中发病率较高，故又称旅游者腹泻。
形态
* 有两个不同发育阶段：
* 1 滋养体
* 2 包囊
滋养体
* 呈半个倒置梨形，9～21μm× 5～15μm × 2～4μm
* 两侧对称，背凸腹平，腹面前半部向内凹陷成吸盘
* 有4对鞭毛，分为前、后侧、腹、尾鞭毛各1对
* 有1对并列细胞核在吸盘底部
* 有1对轴柱，纵贯虫体中部，不伸出体外
* 1对半月形中体与轴柱1/2相交
鞭毛运动
* 滋养体依靠鞭毛摆动，做活泼的翻滚运动
铁苏木素染色
铁苏木素染色
特殊染色
特殊染色
包囊
* 椭圆形
* 大小为10～14×7～10μm
* 囊壁较厚，囊壁与虫体间有明显空隙
* 未成熟包囊2个核，成熟包囊4个核，多偏于一端
* 可见鞭毛、丝状物、轴柱
铁苏木素染色
* 未成熟的包囊，有2个核
* 囊内可见到鞭毛、丝状物、轴柱等
铁苏木素染色
碘染色
碘染色
生活史
* 繁殖阶段：滋养体，二分裂法繁殖
* 传播阶段：包囊，在外界抵抗力较强
* 寄生部位：主要寄生在十二指肠内，借吸盘吸附肠壁
* 感染期：成熟四核包囊
致病
* 致病机制：尚不完全清楚
* 机械阻隔，营养竞争--大量虫体覆盖小肠黏膜
* 机械刺激-吸盘吸附作用
* 化学损伤-分泌产物、代谢产物毒性作用
* 肠内细菌的协同作用
* 宿主免疫状态-IgA缺乏；免疫功能低下或艾滋病患者，均易发生严重的感染
肠壁上的滋养体
临床表现
* 主要症状
* 腹痛、腹泻、腹胀、呕吐、发热和厌食等
* 典型表现
* 以腹泻为主的吸收不良综合征，腹泻呈水样粪便，量大、恶臭、无脓血
临床表现
* 沿伏期--1～2周，最长45天
* 经导管注人志愿者小肠后，1周后发病
* 长爪沙鼠，5～12天，平均为7天
* 急性期 --仅持续几天
* 有恶心、厌食、上腹及全身不适，或伴低热或寒战。此后，可出现突发性恶臭水泻，胃肠胀气和腹胀
* 粪内偶见粘液，极少带血
* 酷似急性病毒性肠炎、细菌性痢疾、食物中毒、急性肠阿米巴病、毒性大肠杆菌等
* 主要特征为，潜伏期较长、粪便为水样具恶臭味，明显腹胀，粪内无血、粘液和细胞渗出物等
临床表现
* 亚急性或慢性期--由急性期转变
* 为持续的或反复发作的中、轻度症状
* 为排恶臭味软便(或呈粥样)、肠胀气、腹胀或腹部痉挛性疼痛
* 可有恶心、厌食、暧气、烧心、头痛、便秘和体重减轻等
* 粪便内无脓血和粘液
* 105例临床病例分析
* 80%为轻度至中度亚急性或慢性症状
* 7%有严重症状，如频繁水泻、严重乏力和体重减轻
* 13%为无症状带囊者。
临床表现
* 无症状排囊
* 有相当一部分感染者(成人约13%，儿童约17%)
* 有不同程度的肠道病理组织学改变及吸收功能障碍
* 无症状带囊者持续的时间不清
* 为重要的传染源
* 儿童贾第虫病
* 感染率高
* l～5岁儿童因贾第虫感染而引起腹泻的百分率为17%～54%
* 3岁以下最为常见，为其他年龄组的7倍
* 持续长
* 可造成营养吸收不良，导致身体发育障碍
临床表现
*胆道炎和胆囊炎
* 侵人胆道和胆囊，使胆汁流通不畅
* 胆道感染中，贾第虫所致者占10%～24%
* 150例贾第虫感染者中
* 胆道感染型13例(8.7%)
* 肝炎型5例(3.3%)。
* 无特征性表现--主要为右上腹痛，多为右上腹压痛，食欲减退、发热、乏力、厌油、恶心、呕吐及肝脏肿大等症状，少数病例出现黄疽
* 并发症
* 有比较罕见的肠外并发症如阴道、子宫、芝麻疹、关节炎和视网膜炎等。
诊断
*粪便检查--直接涂片法和浓集法
* 在病程发展的不同时期，有包囊或滋养体
* 急性期或间断发作期--涂片镜检，可见滋养体
* 亚急性期或慢性期--查包囊
* 盐水或碘液涂片法
* 硫酸锌浮聚或醛一醚浓集
* 铁苏木素染色和三色染色法
* 采用隔日1次，连续查3次的方法
* 粪便检查方法的漏诊率很高(30%～50%)
* 粪便检查结果阴性，不能排除感染的可能性
诊断
诊断
诊断
* 小肠法检查
* 对象--粪检未能查到虫体的可疑病例
* 十二指肠或上段空肠引流
* 肠内试验法
* 禁食后，患者吞下有尼龙线的胶囊，线的末端经胶囊一端的小孔引出并粘在受试者口外侧。吞下的胶囊在体内溶解后，尼龙线便自行松开、伸展，经3～4小时可达十二指肠和空肠。肠内若有滋养体，便可随肠液一起粘附于尼龙线上。缓缓拉出尼龙线，取线上的粘附物镜检
诊断
* 小肠活体组织检查
* 对象--对粪检和小肠液检查均显示阴性的的可疑病例
* 先做压片初检
* 制片后，置空气干燥l小时，甲醇固定30分钟，Giemsa染色
* 贾第虫着紫色，上皮细胞粉红色，可鉴别二者
* 后做连续切片，染色、镜检
* 用Bouin氏液固定后，用改良的Masson三色染色法染色，* 虫体多见于微绒毛的刷状缘，在腺腔的更多，侵入组织者则较罕见
诊断
* 免疫学诊断方法
* 酶联免疫吸附试验 (ELISA)
* 较高的敏感性和特异性
* 阳性率可达75%～9l%
* 材料--纯培养
? 颗粒性抗原(完整滋养体)
? 可溶性抗原(超声粉碎)。
* 运用
? 临床诊断
? 血清流行病学
诊断
* 免疫学诊断方法
* 间接荧光抗体试验 (IFA)
* 特异性和敏感性均较理想
* 阳性率8l%～97%(较ELISA高)
* 操作过程较烦
* 需荧光显微镜
* 材料
? 滋养体(纯培养)
? 包囊(粪便分离、纯化)
诊断
* 免疫学诊断方法
* 对流免疫电泳(CIE)
* 检测粪内贾第虫抗原的方法
* 特异性和敏感性均较强
? 33例中有94.4%显示阳性
? 正常人和其他64例由不同原因引起之腹泻患者均为阴性
* 操作程序很简单，也无需特殊设备
* 材料--高效价抗血清
? 用超声粉碎纯培养滋养体制备的抗原免疫家兔
* 运用
? 现症病人的诊断及疗效考核
? 流行病学现场调查研究
诊断
* 免疫学诊断方法
* 斑点免疫结合试验(DIBA)：
* 阳性率可高达92.3%
* 过程
? 分离纯化包囊(经用蔗糖密度梯度离心技术)
? 抗血清(免疫家兔)
? 吸收(大肠杆菌)
? 检测(斑点免疫结合试验)
诊断
* 免疫学诊断方法
* 分子生物学诊断方法
* 用32P标记贾第虫全基因组DNA制备的探针
* 敏感性
* 10ng虫体DNA
* 105个滋养体
* 104个包囊
* 特异性很强
* 不与阴道毛滴虫、溶组织内阿米巴、弓形虫以及贾第虫患者粪便上清液发生交叉反应
诊断
* 商品化试剂盒
* Alexom-Trend公司生产的ProSpecT (Giadia/Cryptosporidium Microplate Assay)
* 检测粪便样本
* 敏感性100%
* 特异性98.6%
诊断
* 商品化试剂盒
* Bectom Dickinson公司生产的ColorPAC (Giadia/Cryptosporidium Rapid Assay)
* 固相免疫层析试验
* 检测粪便样本
* 敏感性100%
* 特异性100%
诊断
* 商品化试剂盒
* Meridian Bioscience公司生产的The ImmunoCard STAT!
(Cryptosporidium / Giadia rapid assay)
* 固相免疫层析定性检测试验
* 检测粪便样本
* 170份阳性和231份阴性样本
* 敏感性93.5%
* 特异性100%
诊断
* 商品化试剂盒
* BIOSITE Diagnostics公司生产的
Triage parasite panel(寄生虫筛选膜)
* 酶免疫测定膜
* 检测新鲜粪便样本
* 15分钟完成
* 170份阳性
* 敏感性95.5%
* 特异性97.4%
预后
* 若不及时治疗，多发展为慢性，表现为周期性稀便，反复发作，大便甚臭，病程可长达数年。
* 儿童患者可由于腹泻、脂肪泻，引起贫血等营养不良，导致生长滞缓。
* 虫体寄生在胆道系统，可能引起胆囊炎或胆管炎。
流行
* 分布呈世界性，在前苏联特别严重，美国也接近于流行，发展中国家感染人数约为2.5亿。我国分布也很广泛，各地感染率2%～10%之间，儿童高于成人，夏秋季节发病率较高。
流行-现状
* 全球性
* 多见于温带和热带地区
* 1%～20%
* 与当地的经济条件、卫生状况密切相关
* 差者，达10%～20%
* 拉丁美洲：危地马拉(20%)
* 非洲：津巴布韦(22%)、埃及(35%)、塞舌尔群岛(43%)
* 发展中国家感染人数约为2.5亿
流行-欧洲
* 俄罗斯-苏联
* 2002年2～10月，1个Perm镇的医院，* <2岁200人21%
* 3～6岁297人74226.6% 26.4%
* 4～14岁245人30.6%
* 伏尔加格勒市
* 近5年6.3%
* 7～14随岁儿童约占总数的50%
* 学龄前儿童 31.9%
流行-欧洲
* 德国
* 2001年出现第1例，* 地表水和无保护的地下水中有包囊
* 荷兰
* 一难民营(来自非洲)
* 956人5%
* <13岁19%
* 斯洛伐克
* 一楼居民，下水道堵塞
* 7人全部感染
流行-北美
* 美国
* 被称为"头号"肠道寄生虫
* 地方性流行+暴发流行
* 在1965～1977年间，有10个州共发生23起由饮水引起的贾第虫病的暴发流行
* 在1995～1996年间，有13个州共发生22次水传性疾病的暴发流行，其中最大的一起为贾第虫病流行，感染者高达1 449人，占总患病人数的1/2以上
* 1979～1990年共发生7起流行，病人200+人
* 全国监测结果
* 病例数，由1992年的12 793例--1996年的27778例
* 1997年总感染率9.5/十万......（后略) ......
饮用水与寄生虫
内容
* 生物的生活方式和定义
* 蓝氏贾第鞭毛虫
* 隐孢子虫
* 有关饮用水原虫含量的标准
生物的生活方式和定义
* 自由生活
* 所谓自由生活是指各种生物体在自然界中能独立的生活，不一定需要其他生物的帮助，也不对其他生物产生危害
* 种类多
* 如牛与马
生物的生活方式和定义
* 共生生活
* 是指某些生物的生存需要其他生物的帮助，但不对给予帮助的生物产出危害
* 互利共生-互相依赖，两方均受益
* 如牛胃内的纤毛虫，以牛胃内的植物纤维为食，分解后有力牛的消化，其尸体是牛的蛋白质来源
* 片利共生-互相依赖，一方受益，另一方既不受益也不受害
* 如口腔中的齿龈内阿米巴，以口腔细菌、食物细粒和死亡的上皮细胞为食，但不入侵机体的组织
生物的生活方式和定义
* 寄生生活
* 是指某些生物一定或在生存过程中，需要其他生物的帮助，同时还对给予帮助的生物产生危害
* 能引起生物危害的生物体大多营寄生生活
* 专性寄生-一定要寄生，不然不能存活
* 如贾第贬毛虫、隐孢子虫
* 兼性寄生-既可自由生活，也可寄生生活
* 如棘阿米巴
蓝氏贾第鞭毛虫
* 蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia )简称贾第虫。
* 寄生人体小肠、胆囊，主要在十二指肠，可引起腹痛、腹泻和吸收不良等症状，致贾第虫病(giardiasis)
* 本病世界性分布，由于在旅游者中发病率较高，故又称旅游者腹泻。
形态
* 有两个不同发育阶段：
* 1 滋养体
* 2 包囊
滋养体
* 呈半个倒置梨形，9～21μm× 5～15μm × 2～4μm
* 两侧对称，背凸腹平，腹面前半部向内凹陷成吸盘
* 有4对鞭毛，分为前、后侧、腹、尾鞭毛各1对
* 有1对并列细胞核在吸盘底部
* 有1对轴柱，纵贯虫体中部，不伸出体外
* 1对半月形中体与轴柱1/2相交
鞭毛运动
* 滋养体依靠鞭毛摆动，做活泼的翻滚运动
铁苏木素染色
铁苏木素染色
特殊染色
特殊染色
包囊
* 椭圆形
* 大小为10～14×7～10μm
* 囊壁较厚，囊壁与虫体间有明显空隙
* 未成熟包囊2个核，成熟包囊4个核，多偏于一端
* 可见鞭毛、丝状物、轴柱
铁苏木素染色
* 未成熟的包囊，有2个核
* 囊内可见到鞭毛、丝状物、轴柱等
铁苏木素染色
碘染色
碘染色
生活史
* 繁殖阶段：滋养体，二分裂法繁殖
* 传播阶段：包囊，在外界抵抗力较强
* 寄生部位：主要寄生在十二指肠内，借吸盘吸附肠壁
* 感染期：成熟四核包囊
致病
* 致病机制：尚不完全清楚
* 机械阻隔，营养竞争--大量虫体覆盖小肠黏膜
* 机械刺激-吸盘吸附作用
* 化学损伤-分泌产物、代谢产物毒性作用
* 肠内细菌的协同作用
* 宿主免疫状态-IgA缺乏；免疫功能低下或艾滋病患者，均易发生严重的感染
肠壁上的滋养体
临床表现
* 主要症状
* 腹痛、腹泻、腹胀、呕吐、发热和厌食等
* 典型表现
* 以腹泻为主的吸收不良综合征，腹泻呈水样粪便，量大、恶臭、无脓血
临床表现
* 沿伏期--1～2周，最长45天
* 经导管注人志愿者小肠后，1周后发病
* 长爪沙鼠，5～12天，平均为7天
* 急性期 --仅持续几天
* 有恶心、厌食、上腹及全身不适，或伴低热或寒战。此后，可出现突发性恶臭水泻，胃肠胀气和腹胀
* 粪内偶见粘液，极少带血
* 酷似急性病毒性肠炎、细菌性痢疾、食物中毒、急性肠阿米巴病、毒性大肠杆菌等
* 主要特征为，潜伏期较长、粪便为水样具恶臭味，明显腹胀，粪内无血、粘液和细胞渗出物等
临床表现
* 亚急性或慢性期--由急性期转变
* 为持续的或反复发作的中、轻度症状
* 为排恶臭味软便(或呈粥样)、肠胀气、腹胀或腹部痉挛性疼痛
* 可有恶心、厌食、暧气、烧心、头痛、便秘和体重减轻等
* 粪便内无脓血和粘液
* 105例临床病例分析
* 80%为轻度至中度亚急性或慢性症状
* 7%有严重症状，如频繁水泻、严重乏力和体重减轻
* 13%为无症状带囊者。
临床表现
* 无症状排囊
* 有相当一部分感染者(成人约13%，儿童约17%)
* 有不同程度的肠道病理组织学改变及吸收功能障碍
* 无症状带囊者持续的时间不清
* 为重要的传染源
* 儿童贾第虫病
* 感染率高
* l～5岁儿童因贾第虫感染而引起腹泻的百分率为17%～54%
* 3岁以下最为常见，为其他年龄组的7倍
* 持续长
* 可造成营养吸收不良，导致身体发育障碍
临床表现
*胆道炎和胆囊炎
* 侵人胆道和胆囊，使胆汁流通不畅
* 胆道感染中，贾第虫所致者占10%～24%
* 150例贾第虫感染者中
* 胆道感染型13例(8.7%)
* 肝炎型5例(3.3%)。
* 无特征性表现--主要为右上腹痛，多为右上腹压痛，食欲减退、发热、乏力、厌油、恶心、呕吐及肝脏肿大等症状，少数病例出现黄疽
* 并发症
* 有比较罕见的肠外并发症如阴道、子宫、芝麻疹、关节炎和视网膜炎等。
诊断
*粪便检查--直接涂片法和浓集法
* 在病程发展的不同时期，有包囊或滋养体
* 急性期或间断发作期--涂片镜检，可见滋养体
* 亚急性期或慢性期--查包囊
* 盐水或碘液涂片法
* 硫酸锌浮聚或醛一醚浓集
* 铁苏木素染色和三色染色法
* 采用隔日1次，连续查3次的方法
* 粪便检查方法的漏诊率很高(30%～50%)
* 粪便检查结果阴性，不能排除感染的可能性
诊断
诊断
诊断
* 小肠法检查
* 对象--粪检未能查到虫体的可疑病例
* 十二指肠或上段空肠引流
* 肠内试验法
* 禁食后，患者吞下有尼龙线的胶囊，线的末端经胶囊一端的小孔引出并粘在受试者口外侧。吞下的胶囊在体内溶解后，尼龙线便自行松开、伸展，经3～4小时可达十二指肠和空肠。肠内若有滋养体，便可随肠液一起粘附于尼龙线上。缓缓拉出尼龙线，取线上的粘附物镜检
诊断
* 小肠活体组织检查
* 对象--对粪检和小肠液检查均显示阴性的的可疑病例
* 先做压片初检
* 制片后，置空气干燥l小时，甲醇固定30分钟，Giemsa染色
* 贾第虫着紫色，上皮细胞粉红色，可鉴别二者
* 后做连续切片，染色、镜检
* 用Bouin氏液固定后，用改良的Masson三色染色法染色，* 虫体多见于微绒毛的刷状缘，在腺腔的更多，侵入组织者则较罕见
诊断
* 免疫学诊断方法
* 酶联免疫吸附试验 (ELISA)
* 较高的敏感性和特异性
* 阳性率可达75%～9l%
* 材料--纯培养
? 颗粒性抗原(完整滋养体)
? 可溶性抗原(超声粉碎)。
* 运用
? 临床诊断
? 血清流行病学
诊断
* 免疫学诊断方法
* 间接荧光抗体试验 (IFA)
* 特异性和敏感性均较理想
* 阳性率8l%～97%(较ELISA高)
* 操作过程较烦
* 需荧光显微镜
* 材料
? 滋养体(纯培养)
? 包囊(粪便分离、纯化)
诊断
* 免疫学诊断方法
* 对流免疫电泳(CIE)
* 检测粪内贾第虫抗原的方法
* 特异性和敏感性均较强
? 33例中有94.4%显示阳性
? 正常人和其他64例由不同原因引起之腹泻患者均为阴性
* 操作程序很简单，也无需特殊设备
* 材料--高效价抗血清
? 用超声粉碎纯培养滋养体制备的抗原免疫家兔
* 运用
? 现症病人的诊断及疗效考核
? 流行病学现场调查研究
诊断
* 免疫学诊断方法
* 斑点免疫结合试验(DIBA)：
* 阳性率可高达92.3%
* 过程
? 分离纯化包囊(经用蔗糖密度梯度离心技术)
? 抗血清(免疫家兔)
? 吸收(大肠杆菌)
? 检测(斑点免疫结合试验)
诊断
* 免疫学诊断方法
* 分子生物学诊断方法
* 用32P标记贾第虫全基因组DNA制备的探针
* 敏感性
* 10ng虫体DNA
* 105个滋养体
* 104个包囊
* 特异性很强
* 不与阴道毛滴虫、溶组织内阿米巴、弓形虫以及贾第虫患者粪便上清液发生交叉反应
诊断
* 商品化试剂盒
* Alexom-Trend公司生产的ProSpecT (Giadia/Cryptosporidium Microplate Assay)
* 检测粪便样本
* 敏感性100%
* 特异性98.6%
诊断
* 商品化试剂盒
* Bectom Dickinson公司生产的ColorPAC (Giadia/Cryptosporidium Rapid Assay)
* 固相免疫层析试验
* 检测粪便样本
* 敏感性100%
* 特异性100%
诊断
* 商品化试剂盒
* Meridian Bioscience公司生产的The ImmunoCard STAT!
(Cryptosporidium / Giadia rapid assay)
* 固相免疫层析定性检测试验
* 检测粪便样本
* 170份阳性和231份阴性样本
* 敏感性93.5%
* 特异性100%
诊断
* 商品化试剂盒
* BIOSITE Diagnostics公司生产的
Triage parasite panel(寄生虫筛选膜)
* 酶免疫测定膜
* 检测新鲜粪便样本
* 15分钟完成
* 170份阳性
* 敏感性95.5%
* 特异性97.4%
预后
* 若不及时治疗，多发展为慢性，表现为周期性稀便，反复发作，大便甚臭，病程可长达数年。
* 儿童患者可由于腹泻、脂肪泻，引起贫血等营养不良，导致生长滞缓。
* 虫体寄生在胆道系统，可能引起胆囊炎或胆管炎。
流行
* 分布呈世界性，在前苏联特别严重，美国也接近于流行，发展中国家感染人数约为2.5亿。我国分布也很广泛，各地感染率2%～10%之间，儿童高于成人，夏秋季节发病率较高。
流行-现状
* 全球性
* 多见于温带和热带地区
* 1%～20%
* 与当地的经济条件、卫生状况密切相关
* 差者，达10%～20%
* 拉丁美洲：危地马拉(20%)
* 非洲：津巴布韦(22%)、埃及(35%)、塞舌尔群岛(43%)
* 发展中国家感染人数约为2.5亿
流行-欧洲
* 俄罗斯-苏联
* 2002年2～10月，1个Perm镇的医院，* <2岁200人21%
* 3～6岁297人74226.6% 26.4%
* 4～14岁245人30.6%
* 伏尔加格勒市
* 近5年6.3%
* 7～14随岁儿童约占总数的50%
* 学龄前儿童 31.9%
流行-欧洲
* 德国
* 2001年出现第1例，* 地表水和无保护的地下水中有包囊
* 荷兰
* 一难民营(来自非洲)
* 956人5%
* <13岁19%
* 斯洛伐克
* 一楼居民，下水道堵塞
* 7人全部感染
流行-北美
* 美国
* 被称为"头号"肠道寄生虫
* 地方性流行+暴发流行
* 在1965～1977年间，有10个州共发生23起由饮水引起的贾第虫病的暴发流行
* 在1995～1996年间，有13个州共发生22次水传性疾病的暴发流行，其中最大的一起为贾第虫病流行，感染者高达1 449人，占总患病人数的1/2以上
* 1979～1990年共发生7起流行，病人200+人
* 全国监测结果
* 病例数，由1992年的12 793例--1996年的27778例
* 1997年总感染率9.5/十万......（后略) ......
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