第 2 0卷 第 5觑

    2 0 0 0年 9 月

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    NO. 5

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    5种免疫增强剂对猪P B MC增殖反应的影响 S乒f 2 一

    谢明权 ， 宋长 黄 忠. 张春红 ， 杨傲冰， 杜伟 贤 ( 广东省农业科学院兽医研究所， 广东 广州 5 1 。 6 4 D ) —

    — — 一 — — — 一

    凸 摘要： 采用胸腺素、 黄蓖多糖、 人胎盘组织液、 人重组白细胞赍素 2 ( r I t 2 ) 及左旋眯唑， 同浓度刺激体外

    培养不同时间的猪外周血单个桉细胞( P B MC) ， 结果证明这几种佐剂均对猪 P B MC有明显刺激作用， 且与旅

    度有依赖关系. 浓度过高时对其有抑村作用， 适宜的浓度为 1 0 4 倍稀释度。时间因素的影响较小. 但培葬 3 6 h

    扭人各 种佐剂 后 PEMC增殖 反应 未 见增强 。PEMC代表 机体 . 息的细 胞免疫 水平 . 通 过佐剂对 体外培 养的

    P B MC增殖反应水平影响的测定. 为动物用免疫佐剂和免癌增强剂的筛选提供 ，一种朽效方法。

    关键词： 堕 璺± 蔓塑堕： 堕星 查； 鱼壅 堡

    中图分类号 ： $ 8 5 2 . 4 文献标 识码： A 文章编号： 1 0 0 5 4 5 4 5 ( 2 0 0 0 ) 0 5 — 0 4 8 5 0 2

    能够增强动物体免疫能力的免疫增强剂( 佐

    剂) 有许多种， 包括生物活性成分、 细胞因子、 化学

    药物及 中草药类等。测定免疫增强作用的指标有

    多种 ， 如猪外周血单个核细胞( P B MC) 增殖反应 、白细 胞介素 2 ( I L 一 2 ) 分泌水平 、 C TI 活力、 NK细

    胞活性、 特异性抗体产生水平等 但体内测试其各

    种指标受到 许多因素如实验动物、 环境等的影响 ，因而结果变异较大‘ I J 。由于P B MC增殖反应是机

    体总体免疫水平的反映， 抗体的产生 、 细胞因子的

    释放、 细胞杀伤作用的变化等都是 此为基础的，故本试验采用体外培养的 P B MC增殖反应来评

    估免疫增 强剂的作用 ， 以期 建立一种直观、 简便 、易于量化、 易于标准化 的评估药物免疫增强作用

    的方法

    1 材料 与方法

    1 . 1 试验动物 杜长大三元杂猪. 购自广东省畜

    牧所种猪场 ， 体重约 3 O k g ， 性别不限。

    1 . 2 佐 剂 黄芪多糖 ， 黑 龙江生物制 品一厂 出

    品， 批 号 9 7 0 3 ， 多糖含量 2 9 g / L； 小牛胸腺素 ， 武

    汉梅山生化制药厂出品， 批号 9 8 0 4 0 1 ， 含量 2 g /

    收 稿 日期： 1 9 g 9∞一 1 7

    基 金项 日 广东 省 自然科学基 盘重点 资助项 目( 9 6 3 0 0 7 ) 1 广

    东 省自然科学基金青年项 目

    作者简 舟 ： 谢明权 ( 1 9 4 6 ～ ) . 男。 研究员. 博士。

    L； 盐酸 左旋 眯 唑， 广 州市 桥制药 厂 出品， 批 号

    9 8 0 4 0 6 ， 含量 5 g / L； 人 重组 白细胞 介素 2( r I L 一

    2 ) ， 北京四环生物制品厂出品， 批号 9 8 0 2 1 2， 含量

    5 0 0 0 I U/ mL； 人胎盘组织液， 湖南湘潭制药二厂

    出品， 批号 9 8 0 5 1 8 ， 有效成分含量 2 0 。

    1 3 猪 P B MC 无菌采肝素抗凝血， 加入等体

    积的无 Ca ”、 Mg 的 Ha n k s液混匀， 小心重叠于

    等体积的淋巴细胞分离液[ 密度 1 . 0 7 7 ( 0 . 0 0 2 ) ]

    上 ， 1 5 0 0 r / r ai n离心 3 0 mi n ， 吸取中间的白色细

    胞层 ， 用无 C a 、 Mg 。 的 Ha n k s液洗 2次， 用完

    全 RP MI 1 6 4 0培养液洗 1次. 血细胞计数器计算

    细胞数口. 3 l

    1 . 4 P B MC增殖反应的测定 在 9 6孔细胞培

    养板中 ......