针灸临床杂志 2 O O 8年第 2 4卷第 6 期

    实 验 研 究

    百会穴埋线疗法对血管性

    痴呆大鼠学习记忆及 S O D、 N O的影响*

    ’ 王延武 ， 陈华德2

    ( 1 . 浙江中医药大学附属广兴医院， 浙江 杭州 3 1 0 0 0 7 ； 2 . 浙江中医药大学， 浙江 杭州 3 1 0 0 5 3 )

    摘 要： 目的： 观察百会穴埋线疗法对血管性痴呆大鼠学习记忆及 S O D、 N O的影响。方法： 采用夹闭再

    通大鼠双侧颈总动脉的方法建立缺血再灌注损伤 V D模型。设立假手术对照组、 模型对照组、 电针组和

    埋线组。通过 M o r r i s 水迷宫观察 V D大鼠的学习和记忆能力； 并检测 V D大鼠脑组织 s o D活性和 N O含

    量。结果： 百会穴位埋线疗法能显著缩短 V D大鼠定位航行试验的潜伏期； 在空间探索试验中， 能提高

    跨越原平台位置的次数； 埋线组较模型组脑内S O D活性和 N O含量均明显升高。结论： 埋线疗法能改善

    V D大鼠的空间学习和记忆能力， 提高V D大鼠脑组织 N O的含量、 增强 S O D活力， 疗效与电针相近。

    关键词： 埋线疗法； 百会穴； 血管性痴呆； 学习记忆

    中图分类号： R 2 4 5 文献标识码： A 文章编号： 1 0 0 5— 0 7 7 9 ( 2 0 0 8 ) 0 6—0 0 4 7 —0 3

    血管性痴呆 ( V a s c u l a r d e m e n t i a ， V D) 是我 国最常见

    的老年期痴呆类型…， 不仅影响病人的健康和生活质

    量， 而且造成巨大的社会和家庭负担。学习记忆障碍

    是血管性痴呆的首要表现， 改善学习记忆能力是防治

    V D的关键。对 V D的治疗， 目前国内外尚无特效疗

    法， 针灸对 V D有肯定的治疗作用[ 。穴位埋线疗法

    与针灸疗法相比， 具有操作简单、 作用时间长、 疗效持

    久的优点， 目前未见有穴位埋线疗法治疗血管性痴呆

    的研究报道。本实验观察了百会穴埋线疗法对 V D大

    鼠学习记忆的影响及 S O D、 N O含量的变化。现将结

    果报告如下。

    1 材料

    1 . 1 实验动物 选用健康雄性 S p r a g u e —D a w l e y ( S D )

    大鼠6 5只， 体重 1 8 0～2 0 0 g ， 购自中国科学院上海实

    验动物中心， 由浙江中医药大学实验动物中心饲养。

    1 . 2 主要仪器设备 穴位埋线器： 北京任晓艳穴位埋

    线医学研究中心； 药物羊肠线： 北京任晓艳穴位埋线医

    学研究中心； 韩氏穴位神经刺激仪： 北京华卫产业开发

    公司， I J - I 2 02 H； B T S 1 5 A半 自动生化分析仪： 上海精宏

    实验设备有限公司； Mo r r i s 水迷宫实验系统： 北京现代

    太极电子有限公司；

    1 . 3 试剂 S O D检测试剂盒： 南京建成生物工程研究

    所， 批号： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 ； N O检测试剂盒： 南京建成生物

    *基金项目： 浙江省中医药管理局资助课题， 编号： 2 0 0 6 0 2 1 2

    作者简介： 王延武( 1 9 7 9 一) ， 男， 医师， 医学硕士， 主要从事针灸调节脑功

    能障碍的研究。

    工程研究所 ， 批号： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 5 ； 考马斯亮蓝检测试剂

    盒： 南京建成生物工程研究所， 批号： 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 。

    2 方法

    2 . 1 Mo r r i s 水迷宫游泳训练 把大鼠置于 M o r r i s 水迷

    宫学习训练 3天， 训练过程具体如下： M o r r i s 水迷宫为

    一

    圆形不锈钢水池， 直径 1 2 0 c m， 高5 8 c m， 池壁池底黑

    色， 水池内水深约 3 1 . 5 c m， 水温保持 2 3±2 ~ C， 池壁上

    4个等距离点将水池均分为第 1至第4个象限， 任选 1

    个象限( 第 1 象限) 并在其中央放置一直径 1 1 c m， 高

    3 0 . 5 c m的圆形透明站台， 站台顶没于水面下 1 c m， 距

    离池壁 3 0 c m， 站台在整个实验中位置保持不变， 水池

    正上方悬挂摄像头， 通过视频采集系统采集水迷宫内

    信息并输入计算机。把每只大鼠从第一象限的中点，头贴水池壁放入水池中， 让大鼠在迷宫里游 2 n l l ‘ n 。将

    2 m i n内不能找到站台的大鼠引导至平台， 使大鼠在平

    台站立 1 m i n ； 2 r ai n内能找到站台的大鼠， 也使之在平

    台站立 1 m i n ， 使大鼠熟悉周围的环境和站台的位置。

    每只大鼠在第 1 象限做完以后， 再依次将大鼠从第 2 、第 3 、 第 4象限放入水池中， 方法同上。第 1天和第 2

    天为训练期， 不记录成绩。第 3天开始记录大鼠游泳

    成绩。记录大鼠从入水到寻找并爬上站台的时间( 定

    位航行实验) ， 2 r ai n内不能找到站台的大鼠， 其逃避潜

    伏期以2 m i n 计。将6 5只大鼠全部完成定位航行实验

    后， 撤去站台， 按顺序从第 3 象限池壁中点头贴壁放入

    水中， 让大鼠在水池中游 2 m i n ， 系统将自动记录大鼠

    在水池的运动轨迹( 空间探索实验) 。这样每只大鼠共

    记录5次实验成绩， 其中前 4次为与 1 、 2 、 3 、 4象限相

    维普资讯 http://www.cqvip.com 对应的定位航行实验成绩， 第 5次为空间探索成绩。

    实验过程中， M o r r i s 水迷宫分析参数、 水温、 室温、 周围

    环境等基本保持不变， 以避免外界因素对实验的干扰。

    2 . 2 造模方法 V D大鼠模型制备参考李氏[ 3 ] 的方法

    并加以改进： 用 3 %异戊巴比妥钠( 0 . 1 5 m l / 1 0 0 g体

    重) 腹腔注射麻醉大鼠， 把大鼠头部朝上固定于自制大

    鼠固定仪上， 充分暴露颈部， 颈正中行约 1 c m长的纵

    向切口， 分离双侧颈总动脉， 套以“ 4 ” 号医用丝线， 阻断

    双侧颈总动脉血流 2 0 mi n后再灌注 1 0 m i n ， 然后再阻

    断2 0 m i n ， 再灌注后缝合切口。第 1 次阻断颈总动脉

    的同时在距大鼠尾端约 1 c m处剪尾放血， 放血量为大

    鼠总血容量( 占体重的7 . 4 %) 的 1 0 %， 然后结扎止血。

    假手术对照组大鼠只分离双侧颈总动脉， 不阻断血流

    和剪尾放血， 其余同模型制备的操作。术后常规饲养

    大鼠2 天， 造模后第 3天选择符合脑缺血征象以及无

    肢体残疾和视力受损的大鼠作为合格的实验动物模

    型。

    2 . 3 实验分组 把造模成功的 V D大鼠模型随机分

    为模型对照组、 电针治疗组和埋线治疗组， 加上假手术

    对照组， 实验共分4组。每组有9只大鼠。实验处理：

    ①埋线治疗组： 对百会穴进行埋线治疗。埋线时需 2

    人配合， 一人左手固定大鼠头颈部， 右手固定大鼠后

    肢， 另一人穿刺埋线。埋线方法： 先将羊肠线置于消毒

    弯盘中， 并剪成 0 . 6 c m长的小段。参照《 实验针灸

    学》 ] 中大鼠穴位定位方法取“ 百会” 穴( 顶骨正中处) ......