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编号:46837
细胞和分子免疫学实验技术金伯泉.pdf
http://www.100md.com 2020年11月12日
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    参见附件(31248KB，149页)。

    细胞和分子免疫学实验技术主要介绍了免疫血清的制备，免疫球蛋白的纯化、标记和应用；免疫细胞的分离技术，免疫荧光染色和流式细胞术分析，淋巴细胞增殖功能和杀伤功能的测定，细胞因子生物学活性以及免疫学方法检测；同时简要介绍了生物传感器在免疫学中的应用

    内容简介

    该书较全面、具体地介绍现代细胞和分子免疫学常用的实验技术。主要包括免疫血清的制备，免疫球蛋白的纯化、标记和应用；免疫细胞的分离技术，免疫荧光染色和流式细胞术分析，淋巴细胞增殖功能和杀伤功能的测定，细胞因子生物学活性以及免疫学方法检测；同时简要介绍了生物传感器在免疫学中的应用。每种实验技术在简要说明其理论依据的同时，就实验技术步骤、试剂和器材以及注意事项都一一作了说明。本书适用于免疫学以及免疫学相关专业硕士研究生实验指导或课题研究，对于从事基础和临床免疫学的研究也有参考使用的价值。

    免疫血清的制备

    免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等)，也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体，常可获得高效价的免疫血清；而使用免疫原性弱的抗原免疫时，则需同时加用佐剂以增强抗原的免疫原性。免疫血清的特异性主要取决于免疫用的抗原的纯度。因此，如欲获得高特异性的免疫血清，必须预先纯化抗原。此外，免疫方案包括抗原的剂量、免疫途径、免疫次数以及注射抗原的间隔时间等，也是影响免疫血清效价的重要因素。

    免疫血清的制备的原理

    具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同抗原决定簇为不同特异性的B细胞克隆所识别，因此由某一抗原刺激机体后产生的抗体，实际上为针对该抗原分子表面不同抗原决定簇的抗体混合物(即多克隆抗体)。另外，抗体的产生具有回忆应答的特点，这是由于记忆性B细胞和记忆性T细胞参与再次应答所致。在基础免疫的基础上，多次重复注射免疫原，不仅可获得高效价抗体，同时由于抗体亲和力的成熟，抗体的亲和力可明显提高。

    新型免疫佐剂(小鼠用)ImmunEasy的应用

    佐剂属于非特异性免疫增强剂。其种类繁多，如卡介苗、脂多糖、氢氧化铝、明砚、矿物油，以及近年来开始应用的脂质体和CpC寡核苷酸等。佐剂主要通过延长抗原在体内的潴留时间(如矿物油和明矾等)以及非特异地增强机体对特异性抗原的免疫应答(如单磷酸脂和CpG寡核苷酸)两种机制来增强机体对抗原的免疫应答。弗氏完全佐剂则兼有这两种机制。ImmunEasy是一种小鼠用新型免疫佐剂，其主要成分是CpG寡核苷酸。与传统的弗氏佐剂相比，ImmunEasy有着高效、安全、使用方便、省抗原、省时等优点。

    细胞和分子免疫学实验技术金伯泉截图