甘氨酰谷氨酰胺对粤黄鸡免疫功能的影响.pdf
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参见附件(172kb)。
畜牧兽 医学报 , 2 0 0 5 , 3 6 ( 9 ) , 9 5 6~9 5 9
Ac t a Ve t e r i n ar i a e t Zo o t e c hni c a Si n i c a
甘氨酰谷氨酰胺对粤黄鸡免疫功能的影响
朱晓彤 , 崔志英 , 高 萍 , 江青艳, 束 刚 , 徐平稳 , 傅伟龙
( 华南农业大学动 物科 学学院 , 广州 5 1 0 6 4 2 )
关键 词 :甘氨酰谷氨酰胺 ; 鸡; 免疫器官 ; 淋巴细胞 ; I L一 2 ; I L一 6
中图分类号 :$ 8 5 2 . 4 文献标识码 :A 文章编号 :0 3 6 6 — 6 9 6 4 ( 2 0 05 ) 0 9 — 0 9 5 6 — 0 4
谷氨酰胺( Gl n ) 是动物血液及其它组织 中含量
最丰富的一种氨基酸, 在维持免疫细胞的正常功能、调节机体免疫机能方面起着重要的作用。Gl n是淋
巴细胞的主要能量来源 , 在淋 巴细胞、 巨噬细胞 、 中
性粒细胞的增殖和活化以及巨噬细胞 、 中性粒细胞
的过氧 化物 的产 生 中均 具有 重要 的作 用口 ] 。但
是 , Gl n的溶 解度较低 , 在水 中很 不稳定 , 易分解 。
上述 特性 限 制 了 Gl n的应 用 。甘 氨 酰谷 氨 酰胺
( Gl y c y l - Gl u t a mi n e , Gl y - Gl n) 是由甘氨酸和谷氨酰
胺组成的二肽 , 相对分子质量为 2 0 3 . 1 9 7 U, 其水溶
液较稳定 , 且 吸收速 度 比 Gl n单体快 。 目前 Gl y -
Gl n已取代 Gl n在医学临床 中得到应 用 , 但是在动
物生产中应用的报道较少[ 3 ] 。
本试验 以粤黄鸡为研究对象 , 通过饮水方式添
加 Gl y - Gl n, 观察不 同剂量 的 Gl y - Gl n对粤黄鸡 的
免疫器官发育 、 血清 中自细胞介 素一 2 ( I L 一 2 ) 和 白细
胞介素- 6 ( I L - 6 ) 水平 以及淋 巴细胞增殖及分泌功能
的影响 , 同时采用 离体细胞培养 方法 , 研究 外源性
Gl y - Gl n对淋 巴细胞增 殖及分 泌功能 的影 响, 以探
讨 Gl y - Gl n对鸡免疫功能影响的机制 。
l 材料与方法
1 . 1 饲养试验
3 6 0只 1 1 3龄粤黄鸡( 购 自华南农业大学鸡场)
随机分成 4 组 , 每组 9 0只 , 第 1组为对照组 , 其余 3
组为处理组。1 ~4组通过饮水方式分别添加浓度
为 0 、 1 0 0、 5 0 0 、 1 0 0 0 f f g / L的 Gl y - Gl n溶液。1 ~8
日龄为预试期 , 9日龄开始正式试验 , 至 8 0日龄结
束。0 ~4周龄饲喂广东省农科院畜牧研究所实验
饲料厂生产的黄羽小鸡配合饲料 , 5周龄 以后饲喂
黄羽中鸡配合饲料。
收稿 日期 : 2 0 0 4 — 0 7 — 0 9
基金项 目: 广东省科技计划资助项 目( 2 0 0 3 C 2 0 2 0 4 )
作者筒 介: 朱 晓彤 ( 1 9 6 7 一 ) , 女 , 副教授 , 博 士生, 主要从 事动物营养 生
理与免疫调控研 究
1 .2 试验指标
1 . 2 . 1 免疫器官的发育 分别于 4 5 、 8 0日龄随机
从各组抽取 1 8只接 近平 均体重 的鸡屠宰 , 取法 氏
囊 、 胸腺及脾脏称重 , 计算免疫器官指数 。另取血样
制备血清 , 一2 0℃保存 。
1 . 2 . 2 血清 中 I L- 2和 I L - 6含量 的测定 采用放
射免疫法( R1 A) 检测 , 试剂盒购 自天津九鼎生物技
术公司。
1 . 2 . 3 外周血和脾脏淋 巴细胞增殖转化测定 4 5
和 8 0日龄时, 按各组平均体重取 3只鸡 , 分离外周
血和脾脏的淋 巴细胞 , 用浓度为 1 0~ g / mL的 Co n A
处理 2 4 h后 , 采用 MTT法_ 5 检测淋 巴细胞增殖转
化率。
1 . 2 . 4 淋巴细胞培养液 中 I L - 6的检测 将各组
分离出的淋巴细胞按 1 x 1 0 / mL的密度接种于 2 4
孔板上, 培养 4 8 h后 , 用浓度为 1 0~ g / mL的 C o n A
处理 2 4 h, 取培养的细胞上清液 , 3 0 0 0 r / mi n离心 ,用 RI A法测定上清液 中 I L 一 6的含量。
1 . 3 外源性 Gl y - Gl n对离体培养的淋巴细胞增殖
转化和分泌功能的影响
1 . 3 . 1 外源性 Gl y - Gl n对离体培养 的淋 巴细胞增
殖转化的影响 取 8周龄的健康粤黄鸡 , 分离外周
血和脾脏淋巴细胞 , 按 5 ×1 0 / mL的密度接种于 9 6
孔板 , 共设 4组 , 1个为对照组 , 另 3个为处理组 , 每
组 1 0个重复。培养 2 4 h后 , 分别用 0 . 6 、 1 . 2和 2 . 4
mmo l / L的 Gl y - Gl n培养液处理细胞 4 8 h, 采用 M1 v r
法检测由 C o n A诱导的淋 巴细胞增殖转化率。
1 . 3 . 2 外源性 Gl y - Gl n对离体培养 的淋巴细胞分
泌功能 的影响 分 离外周血和脾脏淋 巴细胞, 按 5
×1 0 / mL的密度接种于 2 4孔板上, 细胞培养与处
理同 1 . 3 . 1 。采用 RI A 法检测 细胞上清液 中 I L一 2
和 I L- 6的含 量 。
1 . 4 数据 处理
所得数据均采用 S P S S 1 1 . 0软件进行处理 。组
间差异用邓肯氏新复级差法 比较 , 结果用平均数 ±
维普资讯 http://www.cqvip.com 9期 朱 晓彤等 : 甘氨酰谷氨酰胺对粤黄鸡免疫 功能的影 响 9 5 7
标准误表示 。
2 结 果
2 . 1 Gl y — Gi n对粤黄鸡免疫器官指数的影响
由表 1可知 , 外源性的 Gl y — Gl n对鸡群法 氏囊
的生长无显著影响( P>0 . 0 5 ) ; 1 0 0 、 1 0 0 0 g / L的
外源性 Gl y — Gl n可显著降低 8 0日龄鸡群 的胸腺指
数( P<0 . 0 5 ) , 而 1 0 0 0 g / L的 Gl y — Gl n可显著提
高 4 5日龄时鸡群的脾脏指数 , 5 0 0 g / L的 Gl y - Gl n
则显著提 高 8 0日龄时鸡群的脾脏指数 ( P<0 . 0 5 ) 。
表 1 不同浓度的 Gl y - GI n对粤黄鸡免疫器 官指数的影响
Ta bl e 1 Ef f e c t of d i f f e r e nt d o s a g e s o f Gl y - GI n o n t he i ndi c e s of s pl e e n-bu r s a
o f Fab r i c i u s a nd t hy mu s of Yu e h ua n g b r oi l e r
同一列数据肩标字母 相同或 不标注者 为差异不显著 ......
Ac t a Ve t e r i n ar i a e t Zo o t e c hni c a Si n i c a
甘氨酰谷氨酰胺对粤黄鸡免疫功能的影响
朱晓彤 , 崔志英 , 高 萍 , 江青艳, 束 刚 , 徐平稳 , 傅伟龙
( 华南农业大学动 物科 学学院 , 广州 5 1 0 6 4 2 )
关键 词 :甘氨酰谷氨酰胺 ; 鸡; 免疫器官 ; 淋巴细胞 ; I L一 2 ; I L一 6
中图分类号 :$ 8 5 2 . 4 文献标识码 :A 文章编号 :0 3 6 6 — 6 9 6 4 ( 2 0 05 ) 0 9 — 0 9 5 6 — 0 4
谷氨酰胺( Gl n ) 是动物血液及其它组织 中含量
最丰富的一种氨基酸, 在维持免疫细胞的正常功能、调节机体免疫机能方面起着重要的作用。Gl n是淋
巴细胞的主要能量来源 , 在淋 巴细胞、 巨噬细胞 、 中
性粒细胞的增殖和活化以及巨噬细胞 、 中性粒细胞
的过氧 化物 的产 生 中均 具有 重要 的作 用口 ] 。但
是 , Gl n的溶 解度较低 , 在水 中很 不稳定 , 易分解 。
上述 特性 限 制 了 Gl n的应 用 。甘 氨 酰谷 氨 酰胺
( Gl y c y l - Gl u t a mi n e , Gl y - Gl n) 是由甘氨酸和谷氨酰
胺组成的二肽 , 相对分子质量为 2 0 3 . 1 9 7 U, 其水溶
液较稳定 , 且 吸收速 度 比 Gl n单体快 。 目前 Gl y -
Gl n已取代 Gl n在医学临床 中得到应 用 , 但是在动
物生产中应用的报道较少[ 3 ] 。
本试验 以粤黄鸡为研究对象 , 通过饮水方式添
加 Gl y - Gl n, 观察不 同剂量 的 Gl y - Gl n对粤黄鸡 的
免疫器官发育 、 血清 中自细胞介 素一 2 ( I L 一 2 ) 和 白细
胞介素- 6 ( I L - 6 ) 水平 以及淋 巴细胞增殖及分泌功能
的影响 , 同时采用 离体细胞培养 方法 , 研究 外源性
Gl y - Gl n对淋 巴细胞增 殖及分 泌功能 的影 响, 以探
讨 Gl y - Gl n对鸡免疫功能影响的机制 。
l 材料与方法
1 . 1 饲养试验
3 6 0只 1 1 3龄粤黄鸡( 购 自华南农业大学鸡场)
随机分成 4 组 , 每组 9 0只 , 第 1组为对照组 , 其余 3
组为处理组。1 ~4组通过饮水方式分别添加浓度
为 0 、 1 0 0、 5 0 0 、 1 0 0 0 f f g / L的 Gl y - Gl n溶液。1 ~8
日龄为预试期 , 9日龄开始正式试验 , 至 8 0日龄结
束。0 ~4周龄饲喂广东省农科院畜牧研究所实验
饲料厂生产的黄羽小鸡配合饲料 , 5周龄 以后饲喂
黄羽中鸡配合饲料。
收稿 日期 : 2 0 0 4 — 0 7 — 0 9
基金项 目: 广东省科技计划资助项 目( 2 0 0 3 C 2 0 2 0 4 )
作者筒 介: 朱 晓彤 ( 1 9 6 7 一 ) , 女 , 副教授 , 博 士生, 主要从 事动物营养 生
理与免疫调控研 究
1 .2 试验指标
1 . 2 . 1 免疫器官的发育 分别于 4 5 、 8 0日龄随机
从各组抽取 1 8只接 近平 均体重 的鸡屠宰 , 取法 氏
囊 、 胸腺及脾脏称重 , 计算免疫器官指数 。另取血样
制备血清 , 一2 0℃保存 。
1 . 2 . 2 血清 中 I L- 2和 I L - 6含量 的测定 采用放
射免疫法( R1 A) 检测 , 试剂盒购 自天津九鼎生物技
术公司。
1 . 2 . 3 外周血和脾脏淋 巴细胞增殖转化测定 4 5
和 8 0日龄时, 按各组平均体重取 3只鸡 , 分离外周
血和脾脏的淋 巴细胞 , 用浓度为 1 0~ g / mL的 Co n A
处理 2 4 h后 , 采用 MTT法_ 5 检测淋 巴细胞增殖转
化率。
1 . 2 . 4 淋巴细胞培养液 中 I L - 6的检测 将各组
分离出的淋巴细胞按 1 x 1 0 / mL的密度接种于 2 4
孔板上, 培养 4 8 h后 , 用浓度为 1 0~ g / mL的 C o n A
处理 2 4 h, 取培养的细胞上清液 , 3 0 0 0 r / mi n离心 ,用 RI A法测定上清液 中 I L 一 6的含量。
1 . 3 外源性 Gl y - Gl n对离体培养的淋巴细胞增殖
转化和分泌功能的影响
1 . 3 . 1 外源性 Gl y - Gl n对离体培养 的淋 巴细胞增
殖转化的影响 取 8周龄的健康粤黄鸡 , 分离外周
血和脾脏淋巴细胞 , 按 5 ×1 0 / mL的密度接种于 9 6
孔板 , 共设 4组 , 1个为对照组 , 另 3个为处理组 , 每
组 1 0个重复。培养 2 4 h后 , 分别用 0 . 6 、 1 . 2和 2 . 4
mmo l / L的 Gl y - Gl n培养液处理细胞 4 8 h, 采用 M1 v r
法检测由 C o n A诱导的淋 巴细胞增殖转化率。
1 . 3 . 2 外源性 Gl y - Gl n对离体培养 的淋巴细胞分
泌功能 的影响 分 离外周血和脾脏淋 巴细胞, 按 5
×1 0 / mL的密度接种于 2 4孔板上, 细胞培养与处
理同 1 . 3 . 1 。采用 RI A 法检测 细胞上清液 中 I L一 2
和 I L- 6的含 量 。
1 . 4 数据 处理
所得数据均采用 S P S S 1 1 . 0软件进行处理 。组
间差异用邓肯氏新复级差法 比较 , 结果用平均数 ±
维普资讯 http://www.cqvip.com 9期 朱 晓彤等 : 甘氨酰谷氨酰胺对粤黄鸡免疫 功能的影 响 9 5 7
标准误表示 。
2 结 果
2 . 1 Gl y — Gi n对粤黄鸡免疫器官指数的影响
由表 1可知 , 外源性的 Gl y — Gl n对鸡群法 氏囊
的生长无显著影响( P>0 . 0 5 ) ; 1 0 0 、 1 0 0 0 g / L的
外源性 Gl y — Gl n可显著降低 8 0日龄鸡群 的胸腺指
数( P<0 . 0 5 ) , 而 1 0 0 0 g / L的 Gl y — Gl n可显著提
高 4 5日龄时鸡群的脾脏指数 , 5 0 0 g / L的 Gl y - Gl n
则显著提 高 8 0日龄时鸡群的脾脏指数 ( P<0 . 0 5 ) 。
表 1 不同浓度的 Gl y - GI n对粤黄鸡免疫器 官指数的影响
Ta bl e 1 Ef f e c t of d i f f e r e nt d o s a g e s o f Gl y - GI n o n t he i ndi c e s of s pl e e n-bu r s a
o f Fab r i c i u s a nd t hy mu s of Yu e h ua n g b r oi l e r
同一列数据肩标字母 相同或 不标注者 为差异不显著 ......
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