常见风湿病实验检查.ppt
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参见附件(109kb)。
常见风湿病实验检查
风湿病病因学检查.
RA HLA-DRB10405 0409风险高达58.2%.
SLE HLA-DQB1(nRNP),DQa(SSA/SSB),DQW6(Sm)
DQB1(TCR).
AS HLA-B27.
BS HLA-B51.
PM\DM HLA-B8,DR3,DR1. HLA-DRB1 ，ancestral haplotype祖单倍体 8.1。TNF-?-308A
SSC HLA-DR1,DR5,DRQI；P1A2/FN等位基因与肺纤维化，Scl-70的阳性呈正相关。
SS HLA-DR3. DRBI0602，03(与肾小管酸中毒及SSB密切相关，DQAI0504，DQBI0202。
RF HLA-DR4.
OA HLA-A1,B8.
HLA研究进展
* HLA抗原基因的多态性，决定了其所表达的HLA抗原分子的多态性， 也决定了HLA系统免疫应答的多样性与复杂性。近年来HLA 基因分型迅猛发展，使得HLA 基因分型更加准确，简便和实用。 HLA 基因分型目前大致分为：
限制性片段长度多态性方法PCR- RFLP (restriction fragment length polymophism)。PCR- SSOP 是以核酸杂交为基础的分型技术。 PCR扩增特定的基因片段，与(sequence specific oligonucleotide probes)序列特异性寡核苷酸探针杂交，进行分析鉴定。
* 基因芯片或微阵列技术 (gene chip or DNA microarray)：
* 该技术其原理类似于反向斑点杂交。它是指大规模集成电路控制的机器人在尼龙膜或硅片等固相支持物的表面有规律地合成代表不同基因的寡核苷酸探针，或液相合成探针后，通过点样仪点样于固相支持物的表面。这些探针与放射性标记物或荧光素标记的样品的DNA或 cDNA互补核酸序列相结合，通过放射自显影或荧光检测，对杂交结果进行计算机软件处理分析，获得杂交信号的强度及分布模式图，反映样品中基因表达的情况。
* PCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism)可检测DNA 片段中不同位置的点突变，而不必象PCR- RFLP 那样，必须选择合适的限制酶，使其识别的位点正好位于等位基因的特异性核苷酸序列处。
* PCR- SSP(SEQUENCE SPECIFIC PRIMES)是近年唯一针对急诊和尸体器官移植而设计的。其原理是通过序列特异性引物SSP ，特异的扩增目的DNA 片段，再通过凝胶电泳等手段，判断被扩增序列的存在。
* 作为第3代遗传标记SNP单核苷酸多态位点
* (single nucleotide polymorphism)。已有MHC-SNP分型试剂盒面市。
* 分子的超型及抗原结合肽超基序的发现，表明可从功能上对类分子进行分类使得该技术更为合理，简明和实用，对于疾病相关性的研究和异体移植有重大意义。
AS的相关遗传因素
* 1：HLA是一必需的致病基因，但其遗传风险为16~50%。其亚型有23个之多，从B2701~2723。与AS相关的是2705﹑2704﹑2701等等。
* 2：CYP2D6﹑LMP7和TNF308等TNF-?的等位基因；bosak报道HLA-2﹑Bw4﹑Cw1/2﹑DR1基因频率均高于健康人群。这提示HLA-A﹑B﹑C﹑DR和DQ区域有与AS发病的易感基因存在；HLA-B60增加了AS依赖HLA-B27发病的易感性。
* 链球菌感染的检测
* 1 咽拭子培养 20~25%
* SZ(链球菌酶)检
* 2ASO>500 50%
* 3DNA酶-B>210 85%
* 4ASK(抗链球菌激酶)>8
* 5AH(抗透明质酸酶)>128
* 6ANDS(抗核苷酸)<275
* 抗EBV抗体 RA
* PHS-2(福氏志贺菌) Reiter's
* 肺炎克雷伯菌 AS
* 沙门菌,螺杆菌 ReA
炎性实验室指标
主要针对疾病活动性
ESR:
CRP:2周内>80%, 大于4周<25%
OTHER:1.白细胞及中性粒
细胞. 2.糖蛋白及粘蛋白等.
CRP
CRP与炎症
* CRP是重要的炎性因子,其致炎作用包括:激活补体、刺激细胞因子分泌、上调内皮细胞黏附分子表达、抑制一氧化氮合成、增加纤溶酶原激活物抑制剂-1的水平与活性、增强巨噬细胞对低密度脂蛋白的摄取及单核细胞化学趋化性、上调血管紧张素Ⅱ-1型受体的表达等.
* CRP与肥胖关系密切,而且脂肪细胞也可分泌CRP.
* CRP水平随年龄的增高而升高,女性较高,吸烟、感染和某些药物可使其增高;而饮酒和某些药物可使其降低.
生化检查
* 1.Ca, P,Fe等电解质.
* 2.UA,磷酸钙双水化合物CPP等.
* 3.肝, 肾,血常规等功能检查.
* 4.CPK,LDH同功酶，肌球蛋白，肌凝蛋白重链，肌钙蛋白I(TnI)，等肌酶谱检查.
* 5.蛋白及蛋白电泳检查.
* 6.雌激素,泌乳素等激素检查.
* 7.维生素,骨钙素,TRAP,Pyd,Dpyd等.
雌激素和催乳素PRL
* 大家都知道神经-内分泌-免疫调节网络功能失调，会影响的发生和发展。
* PRL(prolatin)已被证明具有免疫调节作用，对细胞和体液免疫都有促进作用，而且免疫细胞也能产生PRL样物质，发挥自分泌和旁分泌作用。大量研究表明在SLE中PRL与可的松CS比值增高反与病情进展相关。男性患者PRL水平升高而雄激素功能低下，认为PRL可抑制睾酮的生成，在病因中起作用。但也有人认为不是通过其抑制雄激素而起作用。另外用bromocriptine BRC溴隐停使PRL降低可使SLE病情改善。在RA已证明PRL是AA(adjuvant arthritis)形成的必要条件 ......
常见风湿病实验检查
风湿病病因学检查.
RA HLA-DRB10405 0409风险高达58.2%.
SLE HLA-DQB1(nRNP),DQa(SSA/SSB),DQW6(Sm)
DQB1(TCR).
AS HLA-B27.
BS HLA-B51.
PM\DM HLA-B8,DR3,DR1. HLA-DRB1 ，ancestral haplotype祖单倍体 8.1。TNF-?-308A
SSC HLA-DR1,DR5,DRQI；P1A2/FN等位基因与肺纤维化，Scl-70的阳性呈正相关。
SS HLA-DR3. DRBI0602，03(与肾小管酸中毒及SSB密切相关，DQAI0504，DQBI0202。
RF HLA-DR4.
OA HLA-A1,B8.
HLA研究进展
* HLA抗原基因的多态性，决定了其所表达的HLA抗原分子的多态性， 也决定了HLA系统免疫应答的多样性与复杂性。近年来HLA 基因分型迅猛发展，使得HLA 基因分型更加准确，简便和实用。 HLA 基因分型目前大致分为：
限制性片段长度多态性方法PCR- RFLP (restriction fragment length polymophism)。PCR- SSOP 是以核酸杂交为基础的分型技术。 PCR扩增特定的基因片段，与(sequence specific oligonucleotide probes)序列特异性寡核苷酸探针杂交，进行分析鉴定。
* 基因芯片或微阵列技术 (gene chip or DNA microarray)：
* 该技术其原理类似于反向斑点杂交。它是指大规模集成电路控制的机器人在尼龙膜或硅片等固相支持物的表面有规律地合成代表不同基因的寡核苷酸探针，或液相合成探针后，通过点样仪点样于固相支持物的表面。这些探针与放射性标记物或荧光素标记的样品的DNA或 cDNA互补核酸序列相结合，通过放射自显影或荧光检测，对杂交结果进行计算机软件处理分析，获得杂交信号的强度及分布模式图，反映样品中基因表达的情况。
* PCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism)可检测DNA 片段中不同位置的点突变，而不必象PCR- RFLP 那样，必须选择合适的限制酶，使其识别的位点正好位于等位基因的特异性核苷酸序列处。
* PCR- SSP(SEQUENCE SPECIFIC PRIMES)是近年唯一针对急诊和尸体器官移植而设计的。其原理是通过序列特异性引物SSP ，特异的扩增目的DNA 片段，再通过凝胶电泳等手段，判断被扩增序列的存在。
* 作为第3代遗传标记SNP单核苷酸多态位点
* (single nucleotide polymorphism)。已有MHC-SNP分型试剂盒面市。
* 分子的超型及抗原结合肽超基序的发现，表明可从功能上对类分子进行分类使得该技术更为合理，简明和实用，对于疾病相关性的研究和异体移植有重大意义。
AS的相关遗传因素
* 1：HLA是一必需的致病基因，但其遗传风险为16~50%。其亚型有23个之多，从B2701~2723。与AS相关的是2705﹑2704﹑2701等等。
* 2：CYP2D6﹑LMP7和TNF308等TNF-?的等位基因；bosak报道HLA-2﹑Bw4﹑Cw1/2﹑DR1基因频率均高于健康人群。这提示HLA-A﹑B﹑C﹑DR和DQ区域有与AS发病的易感基因存在；HLA-B60增加了AS依赖HLA-B27发病的易感性。
* 链球菌感染的检测
* 1 咽拭子培养 20~25%
* SZ(链球菌酶)检
* 2ASO>500 50%
* 3DNA酶-B>210 85%
* 4ASK(抗链球菌激酶)>8
* 5AH(抗透明质酸酶)>128
* 6ANDS(抗核苷酸)<275
* 抗EBV抗体 RA
* PHS-2(福氏志贺菌) Reiter's
* 肺炎克雷伯菌 AS
* 沙门菌,螺杆菌 ReA
炎性实验室指标
主要针对疾病活动性
ESR:
CRP:2周内>80%, 大于4周<25%
OTHER:1.白细胞及中性粒
细胞. 2.糖蛋白及粘蛋白等.
CRP
CRP与炎症
* CRP是重要的炎性因子,其致炎作用包括:激活补体、刺激细胞因子分泌、上调内皮细胞黏附分子表达、抑制一氧化氮合成、增加纤溶酶原激活物抑制剂-1的水平与活性、增强巨噬细胞对低密度脂蛋白的摄取及单核细胞化学趋化性、上调血管紧张素Ⅱ-1型受体的表达等.
* CRP与肥胖关系密切,而且脂肪细胞也可分泌CRP.
* CRP水平随年龄的增高而升高,女性较高,吸烟、感染和某些药物可使其增高;而饮酒和某些药物可使其降低.
生化检查
* 1.Ca, P,Fe等电解质.
* 2.UA,磷酸钙双水化合物CPP等.
* 3.肝, 肾,血常规等功能检查.
* 4.CPK,LDH同功酶，肌球蛋白，肌凝蛋白重链，肌钙蛋白I(TnI)，等肌酶谱检查.
* 5.蛋白及蛋白电泳检查.
* 6.雌激素,泌乳素等激素检查.
* 7.维生素,骨钙素,TRAP,Pyd,Dpyd等.
雌激素和催乳素PRL
* 大家都知道神经-内分泌-免疫调节网络功能失调，会影响的发生和发展。
* PRL(prolatin)已被证明具有免疫调节作用，对细胞和体液免疫都有促进作用，而且免疫细胞也能产生PRL样物质，发挥自分泌和旁分泌作用。大量研究表明在SLE中PRL与可的松CS比值增高反与病情进展相关。男性患者PRL水平升高而雄激素功能低下，认为PRL可抑制睾酮的生成，在病因中起作用。但也有人认为不是通过其抑制雄激素而起作用。另外用bromocriptine BRC溴隐停使PRL降低可使SLE病情改善。在RA已证明PRL是AA(adjuvant arthritis)形成的必要条件 ......
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