厌氧细菌学总论.ppt
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参见附件(454KB)。
厌氧细菌学
总 论
厌氧细菌学总论
一、 厌氧菌的分布和正常菌群
二 、厌氧培养方法简介
三 、厌氧菌鉴定方法简介
四 、厌氧菌药敏实验方法简介
五 、关于厌氧菌致病机制的研究近况
六 、作用于厌氧菌的抗菌药物及进展
一、厌氧菌的分布和正常菌群
厌氧菌( Anaerobes)是指一群在菌细胞代谢的呼吸链中不能以分子氧作为终末电子受体的细菌，它们以有机物或无机物作为终末电子受体，必须在低Eh，并含一定浓度CO2环境中才能生长的细菌，它们的能量只能来自酵解途径，这类细菌称为厌氧菌。
2.根据对氧的耐受性分类
(1)专性厌氧菌
兼性厌氧菌
既能在有氧环境中又能在无氧环境中生长的细菌，即既能以分子氧作为终末电子受体，又能以有机物作为终末电子受体；既能通过氧化又能通过酵解途径获得能量的细菌。这类菌严格地说一般不属于厌氧菌的检验和研究范围。
3 .厌氧机理(4个学说)
厌氧菌为什么不能在有氧条件下生长繁殖？
(1) 细胞色素和氧化酶学说
(2)触酶和过氧化物酶学说
(3)Superoxide dismutase(SOD)学说
2O_2+2H+
(4)分子氧干扰和氧化还原电势学说
1) 分子氧干扰厌氧菌的繁殖
2NADHNAD + H2
2)分子氧干扰 RNA的合成
3)Eh是一种物质接受电子(被还原)或放出电子(被氧化)的势能,环境中Eh和含O2浓度成正比, 一般厌氧菌在 -100mv~ - 250mv才能生长, Eh比游离氧更重要, 产气荚膜梭菌只要低Eh, 即使环境中有少量氧也生长.
类杆菌属
新增4个菌种
纤维类杆菌(B.gracilis)
类杆菌属
梭杆菌属
Fusobacter ium,新增加3个新种和3个亚种
龈沟梭杆菌(F.alocis)
③二氧化碳
嗜纤维菌属
新增二个菌种
有害月形单胞菌(S.noxia)
④月形单胞菌属新增加七个菌种
(二)革兰氏阳性无芽孢杆菌
1 .双歧杆菌包括31个菌种24个亚种共55种
2.乳杆菌属包括50个菌种7个亚种
新增加菌种
4. 放线菌属现 包括11个菌种
新增加3个菌种
(三)革兰氏阳性无芽孢厌氧球菌
1.消化球菌属 只有黑色消化球菌一个种
(四)革兰 氏阳性芽孢杆菌-
梭状芽孢杆菌属(Clostridium)
二、厌氧培养方法简介
一个成功的厌氧培养不仅分离培养时保持厌氧，而且在标本采集、输送、培养基制备及接种等过程尽量要求厌氧操作，任何一个环节失误，都可能导致厌氧培养失败。
(一)主要厌氧培养方法
1)物理方法：阻断空气法、煮沸法、真空法、置换法、燃烧法、喷射换气法如转管法。
(二)主要反应
1.CO2和H2的产生
三、厌氧菌的鉴定方法简介
(二)临床常见病种与厌氧菌感染率
2、厌氧菌感染的临床和细菌学特征
(三)厌氧菌检验
4.厌氧菌鉴定的培养基选择原则
1)根据病变所在部位选择培养基种类
5.厌氧菌培养基及其组成
1)营养丰富的物质: 胰蛋白胨、植胨、水解蛋白、动物肽链与蛋白、酵母膏(粉)、牛肉膏、BHI、甚至血。
6. Finegold氏厌氧菌三级鉴定法
二级鉴定
三级鉴定
1. 进行菌的代谢产物的鉴定
3 基因探针初步应用
五、关于厌氧菌致病机制的研究近况
厌氧菌感染是所有细菌感染中最容易被忽略和误诊的，因为厌氧菌作为正常菌群，存在于人体的任何部位，它可以成为条件致病菌引起人的内源性感染。对厌氧菌发病机理的认识是从三方面进行的:
(一)宿主方面的因素
(二)厌氧菌本身的致病因素
(三)混合感染的协同机理
4、在宿主生境中厌氧菌的适应性
2、荚膜和抗吞噬
4 可溶性毒性产物
牙龈卟啉单胞菌、不解糖卟啉单孢菌、核梭杆菌、二氧化碳噬纤维菌等还能产生抗多形白细胞趋化因子的物质。
6 内毒素
3) 细菌间提供必要的生长因子，如类白喉杆菌与产黑色素普氏杆菌混合感染接种于豚鼠皮下，前者产生苯醌类(vit K1)物质，利于后者生长繁殖，形成脓肿。
4) 改变抗菌活性，使感染成为久治不愈的顽症，如B.fragilis可产生氯霉素乙酰转移酶或氨基糖苷水解酶，使混合感染菌得到保护。
5) 改变微环境降低抗菌活性，如E.coli和B.fragilis使氨苄青霉素MIC提高3.6倍,短链脂肪酸使pH降到5.5-6.8, 红霉素等失去活性.
6) 混合感染时耐药因子的传递, 氯林可霉素耐药因子传递产生的耐药作用从5%-27% .
六、作用于厌氧菌的抗菌药物及进展
(一)常用的抗菌药物
1、首先是被确定对厌氧菌无效或低效药物
包括氨基糖甙抗生素如链霉素、卡那霉素、庆大霉素、新霉素妥布霉素、巴龙霉素等，这类药物在低氧化还原电势(Eh)中失活，氨基糖甙类药缺泛有效的运输系统进入厌氧菌的细胞内，因此厌氧菌对氨基糖甙类药具天然耐药性。其次是磺胺类药物，也 无抗厌氧菌活性而不被选用。再则象四环素类药物，虽然早年对抗厌氧菌有一定活性，但是近年证实其耐药性相当的普遍，临床也较少使用。
2、抗厌氧菌药物目前包括8个方面
2) 青霉素类药物
青霉素类药物如青霉素, 对大多数厌氧球菌如消化球菌、消化链球菌，厌氧链球菌等有较好的抗菌活性，但对脆弱类杆菌等无效，因为这些厌氧菌能产生β -内酰胺酶，而使不少的青霉素和头孢菌素失活。而80年代进入临床使用的氨苄西林(Lenampicillin),除了脆弱类杆菌外，对其它类杆菌和革兰氏阳性厌氧杆菌和球菌都有较好作用。80年代后期临床应用的哌拉西林(Piperacillin), 羧苄西林(Carbenicillin)、替卡西林(Ticarcillin)、以及与β-内酰胺酶抑制剂合成药如奥格门丁(Augmentin)即羟氨苄青霉素与克拉维酸2：1
胺酶稳定，且与吞噬细胞有协同杀菌作用，此外还有头孢地尼(Cefdinir)其对需氧性和厌氧性的革兰氏阳性和阴性菌亦具广谱杀菌作用。而S-1090第三代头孢其抗菌活性与头孢地尼(Cefdinir)相近，但对难辨梭菌，脆弱类杆菌抗菌活性比头孢地尼强，半衰期也长，这些头孢菌素都可以在混合感染 的病例子中选用。此外象碳青霉烯类抗生素如Panipenem、meropenem、fropenem、ritlpenen、acoxil及泰宁(Tienam)等，泰宁是亚胺培南和西司他丁纳的复合制剂，其通过特异地抑制细菌胞壁肽聚糖的合成而显示出广谱高效的抗菌活性，对革兰氏阳性和阴性的需氧菌如金葡菌、粪链球菌、绿脓杆菌等，及脆弱类杆菌等厌氧菌的抗菌活性比头孢哌酮等第三代头孢烯类药物都强得多，对久治不愈的厌氧菌、需氧菌的混合感染有较好的治疗作用。
厌氧细菌学
总 论
厌氧细菌学总论
一、 厌氧菌的分布和正常菌群
二 、厌氧培养方法简介
三 、厌氧菌鉴定方法简介
四 、厌氧菌药敏实验方法简介
五 、关于厌氧菌致病机制的研究近况
六 、作用于厌氧菌的抗菌药物及进展
一、厌氧菌的分布和正常菌群
厌氧菌( Anaerobes)是指一群在菌细胞代谢的呼吸链中不能以分子氧作为终末电子受体的细菌，它们以有机物或无机物作为终末电子受体，必须在低Eh，并含一定浓度CO2环境中才能生长的细菌，它们的能量只能来自酵解途径，这类细菌称为厌氧菌。
2.根据对氧的耐受性分类
(1)专性厌氧菌
兼性厌氧菌
既能在有氧环境中又能在无氧环境中生长的细菌，即既能以分子氧作为终末电子受体，又能以有机物作为终末电子受体；既能通过氧化又能通过酵解途径获得能量的细菌。这类菌严格地说一般不属于厌氧菌的检验和研究范围。
3 .厌氧机理(4个学说)
厌氧菌为什么不能在有氧条件下生长繁殖？
(1) 细胞色素和氧化酶学说
(2)触酶和过氧化物酶学说
(3)Superoxide dismutase(SOD)学说
2O_2+2H+
(4)分子氧干扰和氧化还原电势学说
1) 分子氧干扰厌氧菌的繁殖
2NADHNAD + H2
2)分子氧干扰 RNA的合成
3)Eh是一种物质接受电子(被还原)或放出电子(被氧化)的势能,环境中Eh和含O2浓度成正比, 一般厌氧菌在 -100mv~ - 250mv才能生长, Eh比游离氧更重要, 产气荚膜梭菌只要低Eh, 即使环境中有少量氧也生长.
类杆菌属
新增4个菌种
纤维类杆菌(B.gracilis)
类杆菌属
梭杆菌属
Fusobacter ium,新增加3个新种和3个亚种
龈沟梭杆菌(F.alocis)
③二氧化碳
嗜纤维菌属
新增二个菌种
有害月形单胞菌(S.noxia)
④月形单胞菌属新增加七个菌种
(二)革兰氏阳性无芽孢杆菌
1 .双歧杆菌包括31个菌种24个亚种共55种
2.乳杆菌属包括50个菌种7个亚种
新增加菌种
4. 放线菌属现 包括11个菌种
新增加3个菌种
(三)革兰氏阳性无芽孢厌氧球菌
1.消化球菌属 只有黑色消化球菌一个种
(四)革兰 氏阳性芽孢杆菌-
梭状芽孢杆菌属(Clostridium)
二、厌氧培养方法简介
一个成功的厌氧培养不仅分离培养时保持厌氧，而且在标本采集、输送、培养基制备及接种等过程尽量要求厌氧操作，任何一个环节失误，都可能导致厌氧培养失败。
(一)主要厌氧培养方法
1)物理方法：阻断空气法、煮沸法、真空法、置换法、燃烧法、喷射换气法如转管法。
(二)主要反应
1.CO2和H2的产生
三、厌氧菌的鉴定方法简介
(二)临床常见病种与厌氧菌感染率
2、厌氧菌感染的临床和细菌学特征
(三)厌氧菌检验
4.厌氧菌鉴定的培养基选择原则
1)根据病变所在部位选择培养基种类
5.厌氧菌培养基及其组成
1)营养丰富的物质: 胰蛋白胨、植胨、水解蛋白、动物肽链与蛋白、酵母膏(粉)、牛肉膏、BHI、甚至血。
6. Finegold氏厌氧菌三级鉴定法
二级鉴定
三级鉴定
1. 进行菌的代谢产物的鉴定
3 基因探针初步应用
五、关于厌氧菌致病机制的研究近况
厌氧菌感染是所有细菌感染中最容易被忽略和误诊的，因为厌氧菌作为正常菌群，存在于人体的任何部位，它可以成为条件致病菌引起人的内源性感染。对厌氧菌发病机理的认识是从三方面进行的:
(一)宿主方面的因素
(二)厌氧菌本身的致病因素
(三)混合感染的协同机理
4、在宿主生境中厌氧菌的适应性
2、荚膜和抗吞噬
4 可溶性毒性产物
牙龈卟啉单胞菌、不解糖卟啉单孢菌、核梭杆菌、二氧化碳噬纤维菌等还能产生抗多形白细胞趋化因子的物质。
6 内毒素
3) 细菌间提供必要的生长因子，如类白喉杆菌与产黑色素普氏杆菌混合感染接种于豚鼠皮下，前者产生苯醌类(vit K1)物质，利于后者生长繁殖，形成脓肿。
4) 改变抗菌活性，使感染成为久治不愈的顽症，如B.fragilis可产生氯霉素乙酰转移酶或氨基糖苷水解酶，使混合感染菌得到保护。
5) 改变微环境降低抗菌活性，如E.coli和B.fragilis使氨苄青霉素MIC提高3.6倍,短链脂肪酸使pH降到5.5-6.8, 红霉素等失去活性.
6) 混合感染时耐药因子的传递, 氯林可霉素耐药因子传递产生的耐药作用从5%-27% .
六、作用于厌氧菌的抗菌药物及进展
(一)常用的抗菌药物
1、首先是被确定对厌氧菌无效或低效药物
包括氨基糖甙抗生素如链霉素、卡那霉素、庆大霉素、新霉素妥布霉素、巴龙霉素等，这类药物在低氧化还原电势(Eh)中失活，氨基糖甙类药缺泛有效的运输系统进入厌氧菌的细胞内，因此厌氧菌对氨基糖甙类药具天然耐药性。其次是磺胺类药物，也 无抗厌氧菌活性而不被选用。再则象四环素类药物，虽然早年对抗厌氧菌有一定活性，但是近年证实其耐药性相当的普遍，临床也较少使用。
2、抗厌氧菌药物目前包括8个方面
2) 青霉素类药物
青霉素类药物如青霉素, 对大多数厌氧球菌如消化球菌、消化链球菌，厌氧链球菌等有较好的抗菌活性，但对脆弱类杆菌等无效，因为这些厌氧菌能产生β -内酰胺酶，而使不少的青霉素和头孢菌素失活。而80年代进入临床使用的氨苄西林(Lenampicillin),除了脆弱类杆菌外，对其它类杆菌和革兰氏阳性厌氧杆菌和球菌都有较好作用。80年代后期临床应用的哌拉西林(Piperacillin), 羧苄西林(Carbenicillin)、替卡西林(Ticarcillin)、以及与β-内酰胺酶抑制剂合成药如奥格门丁(Augmentin)即羟氨苄青霉素与克拉维酸2：1
胺酶稳定，且与吞噬细胞有协同杀菌作用，此外还有头孢地尼(Cefdinir)其对需氧性和厌氧性的革兰氏阳性和阴性菌亦具广谱杀菌作用。而S-1090第三代头孢其抗菌活性与头孢地尼(Cefdinir)相近，但对难辨梭菌，脆弱类杆菌抗菌活性比头孢地尼强，半衰期也长，这些头孢菌素都可以在混合感染 的病例子中选用。此外象碳青霉烯类抗生素如Panipenem、meropenem、fropenem、ritlpenen、acoxil及泰宁(Tienam)等，泰宁是亚胺培南和西司他丁纳的复合制剂，其通过特异地抑制细菌胞壁肽聚糖的合成而显示出广谱高效的抗菌活性，对革兰氏阳性和阴性的需氧菌如金葡菌、粪链球菌、绿脓杆菌等，及脆弱类杆菌等厌氧菌的抗菌活性比头孢哌酮等第三代头孢烯类药物都强得多，对久治不愈的厌氧菌、需氧菌的混合感染有较好的治疗作用。
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