· 1 4 6 0· 中国老年学杂志 2 0 0 7年 8月第 2 7卷

    盐酸甲氯芬酯联合穴位埋线对血管性痴呆大鼠模型学习记忆及海马齿状 回

    长时程增强的影响

    陈 粲 杨 琼 戴桃李 潘 娅 王旭东 张 敏 ( 贵阳医学院生理学教研室， 贵州 贵阳 5 5 o o o 4 )

    [ 摘 要] 目的 探讨盐酸甲氯芬酯和穴位埋线联合作用对血管性痴呆( V D) 大鼠学习记忆的影响及可能的机制。方法 改良P u l s i n e l l i s四

    血管阻断法建立 V D大鼠模型； 在造模后给予盐酸甲氯芬酯和穴位埋线联合治疗； 采用Mo r r i s 迷宫检测学习记忆能力； 在体记录海马齿状回长时程增

    强( I 胛 ) ， 观察并比较各组于高频刺激( H F S ) 后的变化。结果 经盐酸甲氯芬酯联合穴位埋线作用后 ， 与模型组相 比， 水迷宫成绩显著提高( P<

    0 . 0 1 ) ； 与盐酸甲氯芬酯组比成绩提高明显( P . 0 1 ， P< O . 0 5 ) 。在 H F S后海马齿状回I P 群体峰电位( P s ) 幅值、 P s斜率联合组比模型组显著提高

    ( P0 . 0 5) 。结论 盐酸甲氯芬酯和穴位

    埋线联合作用可改善VD大鼠的学习记忆能力( 比盐酸甲氯芬酯单独作用更为明显) ， 其联合作用对 V D大鼠海马齿状回 I 的易化作用可能是其

    改善学习记忆能力的机制之一。

    [ 关键词] 血管性痴呆； 学习记忆； 长时程增强； 海马齿状回； 埋线； 盐酸甲氯芬酯

    [ 中图分类号] 1 1 9 7 1 ； R 3 3 8 . 6 4 [ 文献标识码] A [ 文章编号] 1 0 0 5 - 9 2 0 2( 2 O O 7) 1 5 - 1 4 6 0 - 0 3

    血管性痴呆( V D) 发病的确切病理生理机制尚不明了， 至

    今也无特效药和治疗手段。盐酸甲氯芬酯( 氯酯醒) 是使用多

    年的中枢兴奋药 ， 主要用于脑外伤的治疗等 ， 随着研究的不断

    深入， 发现它不仅是脑细胞代谢功能活化剂， 还具有促智及抗

    脑缺血等多种药理作用…。穴位埋线 的治疗方法有扶正为主

    的治疗作用。本实验采用氯酯醒联合穴位埋线观察对 V D大

    鼠学习记忆能力的作用并在体记录海 马齿状 回长时程增强

    ( 1 o n g t e r m p o t e n t i a t i o n ， m ) 变化， 探讨氯酯醒联合穴位埋线治

    疗 V D的可能机制， 为临床治疗 V D提供实验依据。

    1 材料 与方 法

    1 . 1 实验器材及药品 B L - 4 2 0 E生物机能实验系统( 成都泰

    盟科技生产) ； S WF 一 1 B型高阻抗微电极放大器( 成都仪器厂生

    产) ； D Y T 一 1 型微电极推进器和脑立体定位仪( 天津医疗器械研

    究所生产) 。盐酸甲氯芬酯胶囊( 广东先强药业有限公司产品

    批号： 0 6 0 1 0 6 ) 。

    1 . 2 动物分组及 V D模型制作 健康雄性 S D大鼠 6 0只， 体

    重 2 8 0～ 3 0 0 g ， 由贵阳医学院动物中心提供。将动物随机分为

    假手术组、 V D模型组、 氯酯醒组和氯酯醒和穴位埋线组( 联合

    组) 。采用改良P u l s i n e l l i S四血管阻断法( f o u r · v e s s e l o c c l u s i o n ，4 一 V O ) 建立 V D大 鼠模 型。模型组、 氯酯醛组和联合组用

    1 0 %水合氯醛( 0 . 3 5 m l / l O 0 g ) 腹腔麻醉， 伏卧固定， 行背侧颈

    正中切口， 暴露双侧第一颈椎横突翼小孔 。 用电凝针烧灼双侧

    翼小孔内的椎动脉， 造成永久性闭塞。再将大鼠仰卧固定 ， 行

    腹侧颈正中切口， 分离双侧颈总动脉， 穿线备用。2 4 h后再用

    水合氯醛腹腔麻醉。 用微动脉夹夹闭双侧颈总动脉 5 m i n 。 共夹

    闭3次， 每次间隔 I h 。假手术组处理步骤同上， 但不进行椎动

    脉烧灼和颈总动脉夹闭。

    1 . 3 治疗方法 待动物造模清醒后， 开始灌 胃给药。氯酯醒

    基金项 目： 贵阳市科技局资助项目( T 2 0 0 6 — 1 2 )

    作者简介 ： 陈 粲( 1 9 4 9 一 ) ， 女， 副教授 ， 硕士生导师， 主要从事神经生理

    研究 。

    组和联合组用氯酯醒按人鼠换算的量( 1 0 0 m g· k g ～ · d ) 溶

    于2 m l 水中灌胃， 假手术组和模型组给予相同体积的蒸馏水灌

    胃， 连续 3 W， 同时联合组按照图谱定位， 在双侧肾俞穴、 足三里

    穴常规消毒后， 用 8号注射针头埋入 0 ， 5 c m长的( 4 - 0 ) 医用羊

    肠线， 每 2 0 d埋线一次 ， 共 2次。

    1 . 4 M o r r i r s 水迷宫测试 第 3周开始。水迷宫为直径 1 6 0

    c m， 高5 0 c m的圆形水池， 水深 3 0 c m， 水温保持 ( 2 5±I ) ℃， 水

    内放入墨汁并混匀。水池等分为四个象限， 在第三象限置于一

    个直径 1 2 c m， 高 2 8 c m的站台， 没于水下2 c m。实验期间水迷

    宫周围 参照物保持不变。①定位航行实验： 实验历时 6 d ， 每

    天上、 下午两个时间段， 早上 I、 Ⅱ象限， 下午Ⅲ、 Ⅳ象限。将大

    鼠面朝池壁放入水中， 记录6 0 S内从入水到爬上站台所需时间

    即逃避潜伏期( 以在站台上停留达到或超过 1 0 s 为上台， 不足

    1 0 S 不作为上台) 。若大鼠未找到站台， 引导大鼠上站 台并停

    留 1 0 S ， 潜伏期记为6 0 S 。②空间探索实验： 第 7天撤出站台，记录大鼠2 m i n内穿过原站台位置的次数。

    1 . 5 L T P的测定 用 2 0 %乌拉坦( 0 . 3 g / k g )+0 . 5 %氯醛糖

    ( 0 . 2 5 g / k g ) 腹腔麻醉大鼠后 固定于脑立体定位仪上， 电极定

    位参照 G e o r g e P a x i n o s脑定位图谱 ， 刺激电极插入内嗅区前穿

    通纤 维 ( p e r f o r a n t p a t h ， P P)间 ( A P 7 . 8 m i l l ， I A. 2 m i l l ， t t 3 . 5

    m i l 1 ) ； 记录电极插 入同侧齿状回颗粒细胞层 ( A P 3 . 5 m m， L 2

    mm， t t 3 . 5 m i l 1 ) 。先给予波宽0 . 1 m s 的单个刺激诱发群峰电位

    ( p o p u l a t i o n s p i k e ， P S ) ， 然后用 1次/ m i n ， 强度为能引起最大 P S

    强度的 1 / 2为测试刺激强度 ， 连续刺激 3 0 m i n ， 之后用同样刺

    激强度的高频刺激( h i g h f r e q u e n c y s t i m u l a t i o n ......