卫生部规划教材《医学微生物学》(第7版)配套光盘ppt:第19章 支原体.PPT
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参见附件(640KB)。
第一节 概述
* 定义
- 缺乏细胞壁
- 形态上呈高度多形性
- 能通过除菌滤器
- 在无生命培养基中能生长繁殖
- 最小的原核细胞型微生物
- 能形成有分支的长丝，故称支原体
一、生物学性状
(一)形态
0.3～0.5 μm
无细胞壁
高度多形性：球、杆、丝状和分枝状等
一般Giemsa染色较好，染为淡紫色
(二)结构
内外两层为蛋白质及糖类，中层为脂类(磷脂为主)，凡作用于胆固醇的物质，如皂素、毛地黄甙、二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。
特殊的顶端结构：
粘附宿主上皮
细胞表面，与支原
体的致病有关。
(三)培养特性
营养丰富的培养基：
10%～20%人或动物血清以提供胆固醇与其
它长链脂肪酸，多数还需添加酵母浸液、组
织浸液、核酸提取物和辅酶。
pH：适宜7.6～8.0(<7.0易死亡)，但解脲脲
原体最适pH5.5～6.5
兼性厌氧：
大多寄生性支原体在37℃时在微氧环境(含
5%CO2和90%N2)中生长最佳。
繁殖方式多样：二分裂繁殖外，还有分节、断裂、出芽或分枝等方式
固体培养基：
2～7天长出直径约10～600 μm的典型的"荷包蛋样"菌落：低倍镜下见菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，外周由颗粒包绕。
液体培养基：
清亮，用颜色变化
单位(CCU)表示。
支原体典型菌落
支原体与细菌L型的异同点
生化反应
(四)抗原结构
?补体结合试验可检测糖脂类抗原
?ELISA试验可检测蛋白质类抗原
?血清抗体可用生长抑制试验(growth
inhibition test, GIT)和代谢抑制试验
(metabolic inhibition test, MIT)以
鉴定
二、致病性与免疫性
(一)致病机制
?荚膜或微荚膜：抗吞噬作用
?毒性代谢产物：神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤
?超抗原：免疫调节
?其它：如穿透支原体粘附侵入CD4+ T细胞引起损伤
?粘附素：粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞
二、致病性与免疫性
(二)所致疾病
?存在广泛，多不致病
?肺炎支原体引起原发性非典型性肺炎
?溶脲脲原体、人型支原体和生殖支原
体可引起泌尿生殖系统感染和不育症
?穿透支原体和发酵支原体为艾滋病的 辅助致病因素
二、致病性与免疫性
第二节 肺炎支原体
- 0.2～0.3μm，高度多形性，如球形、球杆状、棒状、分枝状和丝状；
- 初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中，一般10天左右长出菌落；多次传代后生长加快，菌落呈"油煎蛋"状；
- 能发酵葡萄糖，不能利用精氨酸与尿素；
- 对美蓝、醋酸铊、青霉素不敏感。
(一)致病性
1.主要经飞沫传播，但大多数发生于夏
末秋初，5～15岁青少年发病率最高。
2.含特殊的顶端结构：P1表面蛋白(170 kDa)和P30(32 kDa)为主要的粘附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。
3.肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(如TNF-α、IL-1、IL-6)引起组织损伤。
(二)所致疾病
原发性非典型性肺炎(primary atypical pneumonia)，临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主，有时并发支气管肺炎、皮疹、心血管和神经系统症状。
(一)分离培养
痰或咽拭子接种在SP-4培养基，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定，进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验。
防治原则
大环内酯类药物
喹诺酮类药物
第三节 解脲脲原体
形态：0.5～0.3 μm，单个或成双排列
固体培养：48 h后长出直径15～30 μm
"油煎蛋"状菌落。
最适pH为5.5～6.5。
生化反应：分解尿素，不分解糖类和精氨酸
抵抗力：对1:2000醋酸铊不敏感
抗原：MB抗原是其主要膜抗原，将解脲脲原
体分为A、B两大群，14个血清型
(一)致病机制
-粘附于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；
-产生毒性代谢产物如NH3，对宿主细胞有
急性毒性作用；
-磷脂酶损伤宿主的细胞膜。
病原体检测
接种液体培养基，分解尿素产碱，酚红指示剂由橘黄色变为红色；再取0.2 ml培养物转种于固体培养基，在5%CO2和90%N2的环境中经37℃培养24～48 h，用低倍镜观察菌落，进一步鉴定需用特异抗血清做GIT与MIT。
核酸检测
PCR检测：
检测尿素酶基因、多带抗原(MB-Ag)基因和16S rRNA基因。此法快速、特异，适宜于大批量标本检测。
第四节 人型支原体
-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最适pH7.2～7.4。固体培养基上形成200～300 μm的较大菌落，呈典型的"油煎蛋"状。
-寄居于泌尿生殖道，通过性接触传播，可引起附睾炎、盆腔炎、产褥热等。
-微生物学检测和防治原则同解脲脲原体。人型支原体对大环内酯类抗生素不敏感，对1:2000醋酸铊与红霉素(100 mg/L)不敏感。
第五节 生殖支原体
-生殖支原体基本形态为烧瓶状，能发酵葡萄糖使培养基变酸，不分解尿素和精氨酸。
-培养基上不生长，须在无醋酸铊SP-4培养基生长但缓慢，菌落呈典型的"油煎蛋"状。
-顶端结构有粘附素MgPa，140 kDa，与肺炎支原，能粘附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎。
-较难培养，生长慢，不适宜于常规实验室分离培养。实验室最好的诊断方法是核酸检测。
第六节 穿透支原体
1991年Lo首次从1例艾滋病患者尿中分离出一种新支原体，其形态为杆状或长烧瓶状，一端为顶端结构，具有粘附与穿入的作用。
思考题
1、细菌L型与支原体在生物学性状方面有何相似之处？其主要区别是什么？
2、简述支原体形态结构的主要特征。
3、简述致病性支原体的种类及其致病性。
4、名词解释：支原体(mycoplasma)、冷凝集试验
第一节 概述
* 定义
- 缺乏细胞壁
- 形态上呈高度多形性
- 能通过除菌滤器
- 在无生命培养基中能生长繁殖
- 最小的原核细胞型微生物
- 能形成有分支的长丝，故称支原体
一、生物学性状
(一)形态
0.3～0.5 μm
无细胞壁
高度多形性：球、杆、丝状和分枝状等
一般Giemsa染色较好，染为淡紫色
(二)结构
内外两层为蛋白质及糖类，中层为脂类(磷脂为主)，凡作用于胆固醇的物质，如皂素、毛地黄甙、二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。
特殊的顶端结构：
粘附宿主上皮
细胞表面，与支原
体的致病有关。
(三)培养特性
营养丰富的培养基：
10%～20%人或动物血清以提供胆固醇与其
它长链脂肪酸，多数还需添加酵母浸液、组
织浸液、核酸提取物和辅酶。
pH：适宜7.6～8.0(<7.0易死亡)，但解脲脲
原体最适pH5.5～6.5
兼性厌氧：
大多寄生性支原体在37℃时在微氧环境(含
5%CO2和90%N2)中生长最佳。
繁殖方式多样：二分裂繁殖外，还有分节、断裂、出芽或分枝等方式
固体培养基：
2～7天长出直径约10～600 μm的典型的"荷包蛋样"菌落：低倍镜下见菌落呈圆形，心致密隆起，深入琼脂，外周由颗粒包绕。
液体培养基：
清亮，用颜色变化
单位(CCU)表示。
支原体典型菌落
支原体与细菌L型的异同点
生化反应
(四)抗原结构
?补体结合试验可检测糖脂类抗原
?ELISA试验可检测蛋白质类抗原
?血清抗体可用生长抑制试验(growth
inhibition test, GIT)和代谢抑制试验
(metabolic inhibition test, MIT)以
鉴定
二、致病性与免疫性
(一)致病机制
?荚膜或微荚膜：抗吞噬作用
?毒性代谢产物：神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤
?超抗原：免疫调节
?其它：如穿透支原体粘附侵入CD4+ T细胞引起损伤
?粘附素：粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞
二、致病性与免疫性
(二)所致疾病
?存在广泛，多不致病
?肺炎支原体引起原发性非典型性肺炎
?溶脲脲原体、人型支原体和生殖支原
体可引起泌尿生殖系统感染和不育症
?穿透支原体和发酵支原体为艾滋病的 辅助致病因素
二、致病性与免疫性
第二节 肺炎支原体
- 0.2～0.3μm，高度多形性，如球形、球杆状、棒状、分枝状和丝状；
- 初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中，一般10天左右长出菌落；多次传代后生长加快，菌落呈"油煎蛋"状；
- 能发酵葡萄糖，不能利用精氨酸与尿素；
- 对美蓝、醋酸铊、青霉素不敏感。
(一)致病性
1.主要经飞沫传播，但大多数发生于夏
末秋初，5～15岁青少年发病率最高。
2.含特殊的顶端结构：P1表面蛋白(170 kDa)和P30(32 kDa)为主要的粘附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。
3.肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(如TNF-α、IL-1、IL-6)引起组织损伤。
(二)所致疾病
原发性非典型性肺炎(primary atypical pneumonia)，临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主，有时并发支气管肺炎、皮疹、心血管和神经系统症状。
(一)分离培养
痰或咽拭子接种在SP-4培养基，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定，进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验。
防治原则
大环内酯类药物
喹诺酮类药物
第三节 解脲脲原体
形态：0.5～0.3 μm，单个或成双排列
固体培养：48 h后长出直径15～30 μm
"油煎蛋"状菌落。
最适pH为5.5～6.5。
生化反应：分解尿素，不分解糖类和精氨酸
抵抗力：对1:2000醋酸铊不敏感
抗原：MB抗原是其主要膜抗原，将解脲脲原
体分为A、B两大群，14个血清型
(一)致病机制
-粘附于宿主细胞表面，引起细胞膜损伤；
-产生毒性代谢产物如NH3，对宿主细胞有
急性毒性作用；
-磷脂酶损伤宿主的细胞膜。
病原体检测
接种液体培养基，分解尿素产碱，酚红指示剂由橘黄色变为红色；再取0.2 ml培养物转种于固体培养基，在5%CO2和90%N2的环境中经37℃培养24～48 h，用低倍镜观察菌落，进一步鉴定需用特异抗血清做GIT与MIT。
核酸检测
PCR检测：
检测尿素酶基因、多带抗原(MB-Ag)基因和16S rRNA基因。此法快速、特异，适宜于大批量标本检测。
第四节 人型支原体
-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最适pH7.2～7.4。固体培养基上形成200～300 μm的较大菌落，呈典型的"油煎蛋"状。
-寄居于泌尿生殖道，通过性接触传播，可引起附睾炎、盆腔炎、产褥热等。
-微生物学检测和防治原则同解脲脲原体。人型支原体对大环内酯类抗生素不敏感，对1:2000醋酸铊与红霉素(100 mg/L)不敏感。
第五节 生殖支原体
-生殖支原体基本形态为烧瓶状，能发酵葡萄糖使培养基变酸，不分解尿素和精氨酸。
-培养基上不生长，须在无醋酸铊SP-4培养基生长但缓慢，菌落呈典型的"油煎蛋"状。
-顶端结构有粘附素MgPa，140 kDa，与肺炎支原，能粘附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎。
-较难培养，生长慢，不适宜于常规实验室分离培养。实验室最好的诊断方法是核酸检测。
第六节 穿透支原体
1991年Lo首次从1例艾滋病患者尿中分离出一种新支原体，其形态为杆状或长烧瓶状，一端为顶端结构，具有粘附与穿入的作用。
思考题
1、细菌L型与支原体在生物学性状方面有何相似之处？其主要区别是什么？
2、简述支原体形态结构的主要特征。
3、简述致病性支原体的种类及其致病性。
4、名词解释：支原体(mycoplasma)、冷凝集试验
附件资料：
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