转基因产品通用检测方法最新版.pdf
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2020年10月28日
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参见附件(529KB，11页)。
转基因食品指的是利用转基因生物技术(转基因生物技术是指在特定生物物种基因组导入外源基因并使其有效地表达相应产物的新型育种技术 )获得的转基因生物品系，并以该转基因生物为直接食品或为原料加工生产的食品称为转基因食品。
软件说明
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口。
本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、深圳市易瑞生物技术股份有限公司、辽宁出入境检验检疫局检验检疫技术中心、甘肃中商食品质量检验检测有限公司、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心、吉林省农业科学院、上海市计量测试技术研究院、甘肃省商业科技研究所有限公司。
本标准主要起草人：付伟、王晨光、宋鹏字、杜智欣、魏霜、朱海、洪霞、郑秋月、付辉、何海宁、李飞武、金虹、安小苹、朱水芳、马涛、刘刚、杨光瑞、曹际娟、哀顺捷、黄文胜。
转基因产品通用检测方法
1范围
本标准规定了转基因产品的定性检测方法
本标溶适用于水稻，玉来、大豆、渝菜、马铃害、甜菜、首韵等及其加工产品中转基因成分的实时荧光P'R通用检酒.
本标准方法的最低检出限为0.1%(质量介数).
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注日期的引用文件，仪注日期的版本适用于本文件，凡是不注1期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)运用于本文件
GB/T 682 分析实验室用《1格和试验方法
GB/T 19495.1 转基国产品检测 通用要求利定义
GB/T 19495，3 转基因产品检测 核酸提取纯化方法
GB/T 19495.7 转基四产品检测 抽样和a样方法
8术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
3.118S rRNA基因 185 rRNA gene转冰们185 rDNA.细密钱精体的组外之一，作为植物内落基因
3.2
CaMV 35S启动子355 promoter frem Cawli flowvr masaic viras来自花椰菜花叶病毒(Caulifoscer mosaic virus.CaMV)的35S启动子。
3.3
CaMV 355终止子 35s terminater from Canli flower mosaic wirws来自花椰菜花叶病毒(Canlifloucer mosaic virus，CaMV)的a5s终止子
3.4
NOS终止子 terminator of nopaline synthase gene来自朗脂碱合成酶若因的终止子
3.5
E9终止子 terminater of rihalese-1.5-hiphosphate carboxylase small subunit来自豌豆核阴糖1，5-二确酸茂化酶小亚基(ribalosel1.s-biphosphate carboxylase small sabunit)
基因的3'终止序列.
3.6
par基因 phosphinnthricin acetyltransderase gene来自绿产色链霉菌(Strepromes wiridorkromogemers).编码阶丝菌素乙酸转移商(phosphinothricinGB/T 38505-2020acetyltransderase，PAT).
注：por第因对除草 草封续(ghfosinse)具有耐受性.
转基因
3.7
Pin 1終止子terminator of proteinase inhibitor 1亲自马怜装蛋白酶邦制剂1(proteinase inhibitor 11.Pin 11)的终止子.
Rbes4启动子 promoter of ribulose-1.5-hiphusphate carhoxylase smal subanit 1A来自级南养核制桃-1.5-二确酸胶化而/加乳丽小亚1A(ribulosel，s-biphosphste carboxylase small subunit 1A.Rh-S1)组的基因的启动子.
3.9
DAS40278 5 边界序列5-end evenf-speifrie sequence of DAS40278
DAS40278转化体外源插入片断5，端与玉来基因组的连接区序列注：该序到但括外筹摘人片霞的评分载体序列和1米基因n的部分作列.
3.10
DP305423 3'边界序列3'end event-specifie sequence of DP305423
DP305423转化体外課插人片断3'a与大豆基因组的连接区序列。
挂，该序到包括外源插人片段的第分装体序列和大豆基园n的部分序列
3.11
CV127 5'边界序列5'-nd event-perifie sequence of CV127
CV127转化体外数插入片断5端与大豆基因组的连接区序列。
建：该序列包括外原编入片段的菲分获体序列和大豆基园皿的部分序列
3.12
ct值eycle threshold反庭管内的荧光督号达到设定的岗值时所经历的循环数
3.84试剂与材料
除分有规定外，所有试剂均为分析姹或生化试刻，试验用水符合GB/T 6682中一级水的规格
4.1 实时荧光PCR预湿液
采用经验证符合实时卖光PCR要求的实时荧光PCR预混液
4.2 500 mal/1.乙二臉四乙酸二纳溶液(pH 8.0)
称取18.6 g乙二胺叫乙酸二钠，m人70 ml.水中，并用NaOH溶液词pHM至8.0.1水定容至100 mL..在103.4 kPa(121 ℃)条件下灭菌20 min.
4.3 1mal/L.三经甲基氨基甲烷-盐溶液(pH 8.0称取121.1 g三经甲基氨基甲烷溶解于8n0 mL.水中，用盐酸调pH值至80，加水定容至1000 ml..
在103.4 kPa(121℃)条件下天演20 min.
4.4 TE缓冲液(pll 8.0)
分别登取10 ml.I mol/L三经甲基氨基甲妃-盐溶液(4.3)和2 ml.5o0 mmol/1.乙二般四乙酸二钠溶液(4.2)，年水定容至1000 mL.，在103.4 kPa(121℃)条件下灭菌20 min，
转基因产品通用检测方法截图
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