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编号:47021
基因克隆和DNA分析第七版最新去水印版.pdf
http://www.100md.com 2020年11月9日
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    参见附件(13231KB，66页)。

    基因克隆和DNA分析第七版深入浅出地阐述了分子生物学基本技术如基因克隆、基因表达、PCR、基因组学等的原理，同时又生动地介绍了基因克隆和DNA分析在基础研究、医学、农学、法医学等领域中的实际应用。第7版更是对大家关注的生物制药、基因治疗、基因改良作物等方面作了很多的拓展。

    质粒的分类

    天然存在的质粒的最有用的分类是基于质粒的主要特征来进行的，这种主要特征本质上又是由质粒的基因所决定的。根据这一分类方法，把质粒分为以下5种：

    (1)致育(fertility)质粒或称F质粒(F plasmid)，仅携带转移基因，并且除了能够促进质粒间有性接合的转移外，不再具备其他的特征，如大肠杆菌中的F质粒。

    (2)耐药性(resistance)质粒或称R质粒(R plasmid)携带有能够赋予宿主细菌对某一种或多种抗菌剂的耐药性的基因，如抗氯霉素、氨苄青霉素或水银。R质粒因其通过正常的繁殖而传播，在临床微生物学上具有重要作用，能够对细菌感染的治疗产生深远的影响，如RP4，通常在假单胞菌中被发现，但也能够在其他细菌中出现。

    (3)Col质粒(Col plasmid)编码大肠杆菌素，一种能够杀死其他细菌的蛋白，比如大肠杆菌的ColE1质粒，(4)降解质粒(degradative plasmid)使宿主菌能够代谢一些通常情况下无法利用的分子，如甲苯和水杨酸，例如，恶臭假单胞菌中的TOL质粒。

    (5)毒性质粒(virulence plasmid)赋予宿主菌致病性，比如根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefa-

    ciens)中的Ti质粒(Ti plasmid)，能够在双子叶植物中诱导冠瘦瘤。

    细菌外其他生物体中的质粒

    尽管质粒在细菌中广泛存在，但在其他生物体中却并不常见。最具特征意义的真核状态的质粒是在酿酒酵母菌株中观察到的2 um质粒(2 um cirele)，2 um质粒的发现是非常幸运的，因为人们可以据此构建载体来转化酵母这种非常重要的生物。然而，在其他真核生物中对质粒的研究(比如纤维状霉菌、植物和动物)已证明是令人失望的，这也暗示着似乎许多高等生物细胞并不适合作为质粒的停泊所。

    溶源性噬菌体

    相对于裂解性侵染，溶源(lysogenic)侵染的标志是噬菌体DNA分子在宿主细胞中能够稳定存在，可能在细菌细胞的上千次分裂后仍然存在。对许多溶源性噬菌体来说，噬菌体DNA是以一种游离基因插入的方式插入到细菌的基因组中。这种噬菌体DNA的整合形式[称作原噬菌体(prophage)]是不发挥侵染作用的静止状态，而一个携带有原噬菌体的细菌[这里指的是溶源菌

    (lysogen)]通常从生理上无法与未被侵染的细菌细胞相区分。然而，原噬菌体最终会被从宿主细胞基因组中释放出来，且噬菌体恢复裂解形式，并裂解细胞释放出子代噬菌体。在图2.7中显示的入噬菌体[lambda())]的侵染循环，就是一个典型的溶源性噬菌体侵染循环。

    另有很少一部分溶源性噬菌体进行的是一个完全不同的侵染循环。当M13或相关的噬菌体侵染大肠杆菌时，新的噬菌体颗粒连续装配并从宿主细胞中释放出来。M13 DNA并没有整合到细菌基因组中，因此也不会变成静止状态。对于这类噬菌体来说，细胞裂解永远都不会发生，而被侵染细菌能够持续生长和分裂，但是以一种相对于未侵染细菌来说较慢的速度进行的。

    基因克隆和DNA分析第七版截图