实验诊断学ppt课件:02.ppt
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骨髓细 胞 学 检 查
(Bone Marrow Examination)
主要内容
> 血细胞的生成与发育
> 正常血细胞形态
> 常用血细胞化学染色
> 骨髓细胞检查的临床意义
> 常见血液病血细胞特征
> 急性白血病的MICM分型
一、血细胞生成与发育
血细胞发育规律
(原 始→ 成 熟)
[ 胞体 ] 大→小(巨核细胞相反,早幼粒较原粒大)
[ 胞浆 ]量：少→ 多
颜色：深蓝→浅蓝 →浅红
颗粒：无→有,非特异性→特异性
[ 胞核 ] 大→小(巨核细胞相反)
核型：规则→不规则
染色质：细致疏松→粗糙密集→紧缩成块
核 仁： 有→无
核膜：不明显→明显
[ 核浆比 ]大→小 (巨核细胞相反)
二、正常血细胞形态
红细胞系(Erythrocyte Series)
粒细胞系(Granulocytic Series)
单核细胞系(Monocytic Series)
淋巴细胞系(Lymphocytic Series)
巨核细胞系
(Megakaryocytic Series)
浆细胞系统
(Plasmacytic Series)
>原浆细胞
>幼浆细胞
>成熟浆细胞
三、常用血细胞化学染色
细胞化学染色
? 过氧化物酶( POX)
? 非特异性酯酶( NSE)
? 特异性酯酶 (SE)
? 糖原染色 (PAS)
? 中性粒细胞碱性磷酶( NAP)
过氧化物酶染色
(Peroxidase, POX)
>原理：H2O2 H2O +O2 ↑
POX
联苯胺联苯胺兰+亚硝基铁氰化钠
O2 ↓
暗蓝色的颗粒↓
>结果：粒细胞(+)；单核细胞( ±)；
淋巴细胞( -)
非特异性脂酶
(Non specific esterase, NSE)
> 原理：NSE水解
α-醋 酸 奈 酚 奈酚
+
有色沉淀↓ 重氮染料偶联
> 临床意义：
单核、巨噬(+++)
特异性脂酶
(Specific esterase, SE)
>原理： SE水解
氯醋酸奈酚AS-D奈酚AS-D
+
红色沉淀↓重氮盐偶联
>临床意义：
粒(+++)；单( ±)；淋(-)
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
Neutrophil alkaline phosphatase, NAP
原理：NAP
β-甘油磷酸钠磷酸钠+甘油
PH 9.2
磷酸钠+氯化钙 磷酸钙↓+硝酸钴
硫化钴↓ 硫化铵 + 磷酸钴
NAP临床意义
> 慢粒NAP↓，类白NAP↑
> 急粒NAP↓，急淋NAP↑，急单正常或↓
> 再障NAP↑， PNH者NAP↓
> 化脓感染NAP↑， 病毒感染NAP↓
糖原染色
(Periodic-schiff. PAS)
> 原理：过碘酸氧化
1.2乙二醇 双 醛 基
+
Schiff
红色品红 紫红色↓
> 临床意义：
淋--粗颗粒或团块状阳性
粒--弥漫均匀状阳性
单--细颗粒状阳性
四、骨髓细胞学检查的临床意义
结果分析
> 骨髓增生程度： 有核细胞
巨核细胞
>有核细胞分类
>计算粒/红比值
骨髓增生程度
增生程度 成熟RBC/有核细胞有核细胞(%)
极度活跃 1： 1 > 50
明显活跃 10： 110～20
增生活跃 20： 12～7
增生减低 50： 1< 1
极度减低 300： 1 < 0.5
正 常 骨 髓 象
1. 增 生 活 跃
2. 粒 红 比 正 常(2-4/1)
3. 粒 系(约40-60%)、红 系(约20%)：
增 生 良 好、 各 阶 段 比 例 适 当
细 胞 形 态 无 明 显 异 常
4. 巨 核 细 胞: 易见、产 板 巨 多 见
5. 淋 巴(约20%)、单 核( 约4%)
6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞
7. 无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫
骨髓象检查的临床意义
>增生程度
(极度活跃-亢进：白血病
( 明显活跃-旺盛：白血病、增贫
( 增生活跃-正常
( 增生减低-减低: 慢性再障
( 极度减低-衰竭：急性再障
粒/ 红( 有 核 红 细 胞)：2-4/1
〔临 床 意 义〕
> 正 常：正常骨髓象
粒,红两系以外造血系统疾病
粒,红两系平行增高或减低
>增 高：粒系增高
红系减低
>减 低：红系增高
粒系减低
五、常见血液病血细胞特征
再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)
特 征： 全 血 细 胞 减 少
〔血 象〕
1. 全血细胞减少,淋巴细
胞相对增高
2. 网织红细胞减少
〔 骨 髓 象〕
1. 增生低下
2. 红系(晚幼红多见),粒
系,巨系减 低
3. 非造血细胞增高:浆细
胞,淋巴细胞多见
急 性 白 血 病(Acute Leukemia)
〔血 象〕
1. 血红蛋白、红细 胞
减少,可见幼红细胞
2. 白细胞计数不定,以
原幼稚为主
3. 血小板减少
急 性 白 血 病
(Acute leukemia)
〔骨髓 象〕
1.增生活跃
2.原幼稚细胞异常
增生≥30%(非红系)
3.巨核细胞相对受抑
急性淋巴细胞白血病(L1)
急性淋巴细胞白血病(L2)
急性淋巴细胞白血病(L3)
急粒未分化型 (M1)
急粒部分分化型(M2)
急性早幼粒细胞白血病(M3)
急性粒-单细胞白血病(M4)
急性单核细胞白血病(M5)
急性红白血病(M6)
巨核细胞白血病(M7)
慢 性 白 血 病
(Chronic Leukemia)
〔血 象〕
1.白细胞增高,分类以
成熟细胞为主
(慢粒:嗜酸,嗜碱增高)
2. 血小板早期正常, 晚
期降低
慢 性 白 血 病(Chronic Leukemia)
〔 骨 髓 象〕
1.增生明显活跃
2.粒(淋)系极度增
生, 以成熟为主
3.其它系统受抑
原发性血小板减少性紫癜
Idiopathic Thrombocytopenic Purpura
〔血象〕
1.血小板减少,可见异
形、巨大血小板
2.血色素、红、白细
胞正常
〔骨髓象〕
1.增生活跃
2.粒系、红系正常
3.巨核:增生、产板巨
减少,成熟障碍
六.急性白血病的MICM分型
细胞形态学分型(FAB分型)
>急淋 L 1 -小细胞
L 2- 大细胞
L 3- 空泡
> 急髓M 0-7
急髓白血病FAB 分 型
M1急粒未分化型 原粒≥90%( 非红系)
M2急粒部分分化型 原粒≥30-89%
M3急早粒 早幼粒>30%
M4急粒-单粒单两系细胞均增生
M5急单 原幼单>30%
M6红白血病 红系>50%且形态异常
原粒(原单)+早幼粒(幼单)>30%
M7 巨核白 原幼巨>30%
免疫学分型
> 急淋
( T细胞---CD1、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8
( B细胞---CD9、CD10、CD19、CD20
>急髓
( CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33、CD34
细胞遗传学和分子生物学分型
> M2t ( 8;21 ) AML1-ETO
> M3t ( 15 ; 17 ) PML-RAR?
> CMLt ( 9 ; 22 )BCR-ABL
复习题
> 骨髓检查应用于哪些方面？
> 血细胞发育演变的一般规律？
> 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围？
> 骨髓增生程度分级？
> 粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况？
> 再障的骨髓象与血象特征？
> 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征？
> 慢粒、慢淋骨髓象及血象特征？
> 常用细胞化学染色的鉴别？
骨髓细 胞 学 检 查
(Bone Marrow Examination)
主要内容
> 血细胞的生成与发育
> 正常血细胞形态
> 常用血细胞化学染色
> 骨髓细胞检查的临床意义
> 常见血液病血细胞特征
> 急性白血病的MICM分型
一、血细胞生成与发育
血细胞发育规律
(原 始→ 成 熟)
[ 胞体 ] 大→小(巨核细胞相反,早幼粒较原粒大)
[ 胞浆 ]量：少→ 多
颜色：深蓝→浅蓝 →浅红
颗粒：无→有,非特异性→特异性
[ 胞核 ] 大→小(巨核细胞相反)
核型：规则→不规则
染色质：细致疏松→粗糙密集→紧缩成块
核 仁： 有→无
核膜：不明显→明显
[ 核浆比 ]大→小 (巨核细胞相反)
二、正常血细胞形态
红细胞系(Erythrocyte Series)
粒细胞系(Granulocytic Series)
单核细胞系(Monocytic Series)
淋巴细胞系(Lymphocytic Series)
巨核细胞系
(Megakaryocytic Series)
浆细胞系统
(Plasmacytic Series)
>原浆细胞
>幼浆细胞
>成熟浆细胞
三、常用血细胞化学染色
细胞化学染色
? 过氧化物酶( POX)
? 非特异性酯酶( NSE)
? 特异性酯酶 (SE)
? 糖原染色 (PAS)
? 中性粒细胞碱性磷酶( NAP)
过氧化物酶染色
(Peroxidase, POX)
>原理：H2O2 H2O +O2 ↑
POX
联苯胺联苯胺兰+亚硝基铁氰化钠
O2 ↓
暗蓝色的颗粒↓
>结果：粒细胞(+)；单核细胞( ±)；
淋巴细胞( -)
非特异性脂酶
(Non specific esterase, NSE)
> 原理：NSE水解
α-醋 酸 奈 酚 奈酚
+
有色沉淀↓ 重氮染料偶联
> 临床意义：
单核、巨噬(+++)
特异性脂酶
(Specific esterase, SE)
>原理： SE水解
氯醋酸奈酚AS-D奈酚AS-D
+
红色沉淀↓重氮盐偶联
>临床意义：
粒(+++)；单( ±)；淋(-)
中性粒细胞碱性磷酸酶染色
Neutrophil alkaline phosphatase, NAP
原理：NAP
β-甘油磷酸钠磷酸钠+甘油
PH 9.2
磷酸钠+氯化钙 磷酸钙↓+硝酸钴
硫化钴↓ 硫化铵 + 磷酸钴
NAP临床意义
> 慢粒NAP↓，类白NAP↑
> 急粒NAP↓，急淋NAP↑，急单正常或↓
> 再障NAP↑， PNH者NAP↓
> 化脓感染NAP↑， 病毒感染NAP↓
糖原染色
(Periodic-schiff. PAS)
> 原理：过碘酸氧化
1.2乙二醇 双 醛 基
+
Schiff
红色品红 紫红色↓
> 临床意义：
淋--粗颗粒或团块状阳性
粒--弥漫均匀状阳性
单--细颗粒状阳性
四、骨髓细胞学检查的临床意义
结果分析
> 骨髓增生程度： 有核细胞
巨核细胞
>有核细胞分类
>计算粒/红比值
骨髓增生程度
增生程度 成熟RBC/有核细胞有核细胞(%)
极度活跃 1： 1 > 50
明显活跃 10： 110～20
增生活跃 20： 12～7
增生减低 50： 1< 1
极度减低 300： 1 < 0.5
正 常 骨 髓 象
1. 增 生 活 跃
2. 粒 红 比 正 常(2-4/1)
3. 粒 系(约40-60%)、红 系(约20%)：
增 生 良 好、 各 阶 段 比 例 适 当
细 胞 形 态 无 明 显 异 常
4. 巨 核 细 胞: 易见、产 板 巨 多 见
5. 淋 巴(约20%)、单 核( 约4%)
6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞
7. 无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫
骨髓象检查的临床意义
>增生程度
(极度活跃-亢进：白血病
( 明显活跃-旺盛：白血病、增贫
( 增生活跃-正常
( 增生减低-减低: 慢性再障
( 极度减低-衰竭：急性再障
粒/ 红( 有 核 红 细 胞)：2-4/1
〔临 床 意 义〕
> 正 常：正常骨髓象
粒,红两系以外造血系统疾病
粒,红两系平行增高或减低
>增 高：粒系增高
红系减低
>减 低：红系增高
粒系减低
五、常见血液病血细胞特征
再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)
特 征： 全 血 细 胞 减 少
〔血 象〕
1. 全血细胞减少,淋巴细
胞相对增高
2. 网织红细胞减少
〔 骨 髓 象〕
1. 增生低下
2. 红系(晚幼红多见),粒
系,巨系减 低
3. 非造血细胞增高:浆细
胞,淋巴细胞多见
急 性 白 血 病(Acute Leukemia)
〔血 象〕
1. 血红蛋白、红细 胞
减少,可见幼红细胞
2. 白细胞计数不定,以
原幼稚为主
3. 血小板减少
急 性 白 血 病
(Acute leukemia)
〔骨髓 象〕
1.增生活跃
2.原幼稚细胞异常
增生≥30%(非红系)
3.巨核细胞相对受抑
急性淋巴细胞白血病(L1)
急性淋巴细胞白血病(L2)
急性淋巴细胞白血病(L3)
急粒未分化型 (M1)
急粒部分分化型(M2)
急性早幼粒细胞白血病(M3)
急性粒-单细胞白血病(M4)
急性单核细胞白血病(M5)
急性红白血病(M6)
巨核细胞白血病(M7)
慢 性 白 血 病
(Chronic Leukemia)
〔血 象〕
1.白细胞增高,分类以
成熟细胞为主
(慢粒:嗜酸,嗜碱增高)
2. 血小板早期正常, 晚
期降低
慢 性 白 血 病(Chronic Leukemia)
〔 骨 髓 象〕
1.增生明显活跃
2.粒(淋)系极度增
生, 以成熟为主
3.其它系统受抑
原发性血小板减少性紫癜
Idiopathic Thrombocytopenic Purpura
〔血象〕
1.血小板减少,可见异
形、巨大血小板
2.血色素、红、白细
胞正常
〔骨髓象〕
1.增生活跃
2.粒系、红系正常
3.巨核:增生、产板巨
减少,成熟障碍
六.急性白血病的MICM分型
细胞形态学分型(FAB分型)
>急淋 L 1 -小细胞
L 2- 大细胞
L 3- 空泡
> 急髓M 0-7
急髓白血病FAB 分 型
M1急粒未分化型 原粒≥90%( 非红系)
M2急粒部分分化型 原粒≥30-89%
M3急早粒 早幼粒>30%
M4急粒-单粒单两系细胞均增生
M5急单 原幼单>30%
M6红白血病 红系>50%且形态异常
原粒(原单)+早幼粒(幼单)>30%
M7 巨核白 原幼巨>30%
免疫学分型
> 急淋
( T细胞---CD1、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8
( B细胞---CD9、CD10、CD19、CD20
>急髓
( CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33、CD34
细胞遗传学和分子生物学分型
> M2t ( 8;21 ) AML1-ETO
> M3t ( 15 ; 17 ) PML-RAR?
> CMLt ( 9 ; 22 )BCR-ABL
复习题
> 骨髓检查应用于哪些方面？
> 血细胞发育演变的一般规律？
> 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围？
> 骨髓增生程度分级？
> 粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况？
> 再障的骨髓象与血象特征？
> 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征？
> 慢粒、慢淋骨髓象及血象特征？
> 常用细胞化学染色的鉴别？
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