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编号:10952
乙型肝炎的病原学诊断.ppt
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    乙型肝炎的病原学诊断

    四川大学医学检验系临床微生物教研室

    陶传敏

    要点

    * 简介

    * 抗原组成

    * 传染源

    * 传播途径

    * 病原学诊断

    * 血清学模式及临床意义

    Hepatitis B Virus

    * 乙型肝炎的病原体

    * 在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染

    * 中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%

    Hepatitis B Virus

    HBV virion

    HBV nomenclature

    * HBV: hepatitis B virus

    * HBsAg: hepatitis B virus surface antigen

    * HBsAb: hepatitis B virus surface antibody

    * HBcAg: hepatitis B virus core antigen

    * HBcAb: hepatitis B virus core antibody

    * HBeAg: hepatitis B virus e antigen

    * HBeAb: hepatitis B virus e antibody

    抗原组成(一)--HBsAg

    * 位于病毒表面，是一种糖蛋白

    * 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw)

    * 欧美国家: adw

    * 我国汉族: adr

    * 我国少数民族: ayw

    * 判断HBV感染的指标之一

    * 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs

    抗原组成(二)-- HBcAg

    * 位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的HBcAg

    * 主要成分是蛋白质

    * 刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体)

    * 在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗-HBc

    * 抗-HBc IgM常提示病毒处于复制状态

    抗原组成(三)-- HBeAg

    * 位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白抗原

    * HBeAg和Dane颗粒出现相平行，且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合

    * 血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标

    * 刺激机体产生抗-HBe

    * 抗-HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗-HBe的出现是预后良好的征象

    抗原组成(四)-- Pre-S抗原

    * 位于HBV的外衣壳上，有两种

    * 刺激机体产生抗Pre-S1和抗Pre-S2，能阻断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒的作用

    * 抗Pre-S1和抗Pre-S2的出现，表示病情好转，趋向痊愈

    传染源

    * 患者

    * 潜伏期

    * 急性期

    * 慢性期

    * 无症状HBsAg携带者

    * 高 (>8%): 占45%

    * 一生感染的危险 >60%

    * 婴幼儿感染常见

    * 中等 (2%-7%): 占43%

    * 一生感染的危险是 20%-60%

    * 感染存在于所有年龄组

    * 低 (<2%): 占12%

    * 一生感染的危险 <20%

    * 许多感染发生在成人危险组

    病原学诊断(一)--抗原抗体检测

    * 项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM

    * 方法

    * ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性)

    * 发光免疫分析(定量)

    * 反相间接血凝试验(少用)

    ELISA的基本原理

    * 利用抗原和抗体特异性结合

    * 主要的试剂

    * 固相抗原或抗体

    * 酶标记的抗原或抗体

    * 酶的底物

    ELISA的主要方法

    * 间接法:测定抗-HBs

    * 夹心法：测定HBsAg和HBeAg

    * 竞争法：测定抗-HBc

    * 中和法：测定抗-HBe

    * 捕捉法：测定抗-HBc IgM

    病原学诊断(二)-核酸检测

    * 核酸杂交

    * 探针

    * PCR

    * 引物

    * HBsAg - 感染的标志

    * Anti-HBs - 既往感染/接种疫苗

    * Anti-HBc IgM - 急性感染标志

    * Anti-HBc IgG - 既往或慢性感染

    * HBeAg - 急性病毒复制，有传染性

    *Anti-HBe -病毒不再复制

    * HBV-DNA - 急性病毒复制，比HBeAg更准确；主要用于监测治疗反应

    血清学检测的临床意义

    HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc临床意义