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    · 专题报告 ·

    幽门螺杆菌感染的诊断方法及临床评价

    张万岱 徐令民

    幽门螺杆M ( H e l i c o b a c t e r p y l o r i , H p ) 的鉴定是研究病因

    及致病机理和临床治疗的关健。诊断H p 的方法很多， 机理

    各 异 ， 目 的 及 有 效 性 也 不 一 样 · ?梦 这 些 方 法 的 原 理 和 应 用特点作一简单说明， 并结合实际应用情况对我国1 9 9 9 年

    三 亚 的H p 共 识 意 见 及 诊 断 部 分 作 一 回 顾 和 墨 红 已 一 _ 一 、 饰诊 断方法的原理、 分类及其特点

    ( 一 ) 依据H p 的 典型形态的 形态学检测

    原理依据: l i p 具有典型的形态特点。在自 然生境的胃

    粘膜上一般皇典型的“ S " 弯曲， 可较粗大或细小， 因观察角度

    不同可呈“ c ’型或“ 海鸥状” ， 培养时间较短时可呈典型形态

    或杆状弯曲， 动勺 弱， 电镜下可观察到1 根至数根鞭毛， 多位

    于一端。在生存条件不利的情况下， 如抗生素作用、 培养时

    间较长菌落过于密集或培养条件差时多呈“ U ' ， 形或大小不

    等的球状， 多个细小的球形体常有丝状结构相连。G r a m染

    色呈阴性( 红色)G i e m e e 染色呈紫红色， 银染易呈棕褐色。

    鉴别: 弯曲状形态需与弯曲菌属细菌区别。弯曲菌属细

    菌形态弯曲或呈娜旋状， 也较易发生球形变， 动力强， 但形态

    及大小不一致， 菌体细长， 姗旋数1 至1 0 多个。也需与多种

    螺旋菌( 海尔受螺杆菌、 多种动物胃内的燎旋菌等) 鉴别， 后

    者主要表现为菌体粗、 娜旋多且多致密， 有显著的差别。也

    需与弧菌鉴别， 很少情况下胃内H p 部分形态较典型但部分

    可表现为弧形， 经鉴定也是H p ， 一般弧菌属细菌很少在胃内

    长期定植。根据H p 的形态特点， 建立了多重相应的形态学

    检测方法， 主要有:

    1 . 胃粘膜涂片( 印片) C 啊 染色方法: 活检一块胃粘膜

    组织， 粘腆面在洁净的玻片上涂片成约0 . 5 e m ， 自然干澡

    G r e e n染色油镜观察即可， 方便， 操作时间最短需5 一1 0 m i n ,如果涂片面积不太大， 同一块组织同时作快速尿素醉试验

    ( R L T r ) 一般不 影响结果。 该方法是区 别H p 及海尔曼螺杆菌

    ( H h ) 的最好的方法之一。

    与涂片染色方法类似， 也可以行胃粘膜压片暗视野观察

    或相差显徽镜观察. 裕用油镜观察( x 1 0 0 0 ) 或超高倍镜检

    ( 放大4 0 0 0 倍以上) 。 在液体环境有时可观察到H p 的运动。

    2组织切片特殊染色: 常规活检粘腆包埋切片， 行H E

    染色W a r d - S t a r r y 银染色、 改良G i e } 染色或甲苯胺蓝染

    色等在油镜「 观察， 根据典型形态的H p 进行诊断。3 种染

    作者单位 5 1 1 1 5 1 5 广州， 第一军医大学南方医院全军消化内科研

    究所

    色中以银染色细菌与组织及粘液的对比最好， 而以H E最

    差， G i e m a e 染色界于两者之间。银染色可以介人于组织内或

    腺腔内单个的典型细菌， 而H E 染色仅能观寮到大量或成簇

    的饰。可以区别尿素酶试验均为阳性的H p 或H h ， 但不能

    确定球形变的H p 。此时可通过原位的免疫组化学方法进行

    检测， 而抗体的特异性和敏感性对结果有很大的影响。

    ( 二) 依据饰的 典型生化反应的尿素酶依赖性检测

    l i p 可产生目 前已知活性最强的细菌尿素酶， 分布于胞

    质和胞膜表面， 也可分泌至细胞外， 尿素醉可分解胃液中和

    所定植部位的尿素产生二氧化碳与氨， 后者可中和胃酸而有

    利于细菌定植致病。根据这一生化反应原理， 人们设计了多

    种尿众酶依赖诊断方法。

    原理依据: H p 具有的强尿素酶活性， 远远高于目 前已知

    的产尿素酶的细菌， 自 然状态下H p 定植量也很大， 因此， 通

    过尿素酶活性检测具有敏感和特异的特点。由于服药( 抗生

    家 及 制 酸 药) 等因 家, H p 形态 发生变 形( 球形变) ， 产 尿素醉

    减少， 可能使依赖尿素酶的试验敏感性下降， 因此， 对于服用

    抗H p 药物及P P I 制剂者， 通常要求停药1 个月以上再进行

    尿素酶依赖性试验， 这样才有诊断的价值。但有时也见到数

    月后尿素酶活性才恢复到可检测水平的情况。其他的生化

    反应敏感性、 特异性及实用性不大， 仅有时在细菌培养茵株

    鉴定时用。

    鉴别: 经过不规则治疗， 对尿素醉依赖性试验有较大的

    影响， 易出现假阴性。如降低诊断闷值， 有时与其他产尿素

    酶的细菌( 包括变形杆菌、 翻萄球菌、 醉母菌等) 鉴别较困难。

    但一般都不能通过尿素醉试验区 别活性均较强的饰和H h ,H h 的尿素醉活性可能较H p 弱很多， 但由于H h 在人胃内长

    期定植时细菌t常很少， 尿素醉活性很弱( 可疑或弱阳性) ，与服抗生素后的情况不易区别; 而在急性感染时细茵t也很

    大， 故不能鉴别。

    根据H p 的代谢特点和途径， 已建立了多重相应的生化

    检测方法用于临床， 主要有:

    1 . 快速尿素酶试验( R U C ) : 通常筋要胃镜检查取活检，通过尿素底物被分解， 检测其代谢产物的量， 包括产氨引起

    的p H 明显变化或其他代谢产物的量。 通过对H p 在胃内的

    生境及H p 定植部位的相关性分析， 幽门及胃窦是H p 最先

    定植和最多定植的部位， 其次是胃的小弯侧( 主要是胃角) ，然后是责门、 胃 底和胃 体。 通过对胃 多 点取材的H p 检查， 发

    现月宾虽然不能完全代表H p 在胃内检侧出， 但也没有显著中 华 K ' k. l t 2 0 0 2 生 鱼 旦 A % 8 2业{ I 1 N a t l M 丝 止 C h i n e A u m , e t 里 2 0 0 2 V o l 8 2 S l p p l e m a i l

    性差异， 只要胃窦没有太严重且弥漫的病变， 胃窦粘膜活检

    的快速尿家降试验有足够的代表性。需注意一般在距幽门

    约2 一 5。有胃窦尤其小弯侧钳取， 尽量避免在糜烂和溃疡

    中央及肿物的部位活检。至于反应时间控制方面， 国外倾向

    士检测时间为2 0一 6 0 m i n ， 但不适应我国的临床工作特点

    我国胃镜检查一般3 一 5 m i n 做一例， 于5 一1 0 n u n 完成报告，故 一 般要求1 一 3 m i n 即能得出阳性结果， 3 一1 0 m i n 得出弱

    阳性结果， 对阴性病例的确定一般要求超过1 0 m i n ， 不规则

    服药的病例可适当延长。故可根据出现阳性反应的时间及

    强度半定量胃粘膜中H p 的细菌量。同时需要注意， 尿素在

    液体状态下易缓慢分解( 假阳性) ， 因剂型而异， 不能观察太

    长的时1 1 4 ; 在受潮和半固体状态下也易缓慢潮解。而保质的

    方法多采用中和潮解产生的氨， 不可避免也会降低试剂的敏

    感性

    为f 了 解H p 在活体胃内的分布 ......